INTEGRIERTE CHROMATOGRAPHIE

2D/3D-Chromatographie: zwei oder drei Schritte. Ein Lauf.

Ihre Batch-Methode ist bereits der erste Schritt. ChromaCraft™ fügt den nächsten hinzu – die Orchestrierung der Mehrsäulen-Aufreinigung (2D/3D) auf dem Contichrom® CUBE in einem einzigen integrierten Lauf, mit automatisiertem Transfer, In-line-Verdünnung und vollständiger Methodensteuerung über jede Dimension hinweg.

Webinar anfordern

CUBE-Broschüre herunterladen

Webinar anfordern

CUBE-Broschüre herunterladen

Zwei oder drei Reinigungsschritte in einem integrierten Lauf.

Sobald Sie Ihre erste Batch-Methode auf dem Contichrom® CUBE ausführen, haben Sie die Grundlage für einen 2D-Aufreinigungsprozess geschaffen. Dieselbe Hardware, dieselben Säulen und dieselbe ChromIQ®-Software, mit der Ihr Protein-A-Capture durchgeführt wurde, können das Eluat direkt auf eine zweite Säule leiten – IEX-Polishing, HIC, Entsalzung –, ohne den Lauf zu unterbrechen.

Der CUBE übernimmt die Übergabe automatisch:

In-line-Verdünnung zwischen den Schritten
Kein Zwischentank
Kein manuelles Eingreifen
Keine separate Methodendatei pro Säule

Das ist 2D-integrierte Batch-Chromatographie. Fügen Sie einen dritten Säulenschritt hinzu, wird daraus 3D. Die Twin-Column-Ventilarchitektur des CUBE unterstützt beides nativ, und ChromaCraft™ entwirft die komplette Methode im selben visuellen Gantt-Diagramm-Editor, den Sie bereits für Single-Column-Batch verwenden.

Das Ergebnis ist eine automatisierte, durchgängige Aufreinigungskette — von Capture über Polishing bis Desalting — abgeschlossen in einem einzigen unbeaufsichtigten Lauf. Sammeln Sie einen Produktpool oder fraktionieren Sie nach Bedarf. Die Zeit von der Beladung bis zur finalen gereinigten Fraktion sinkt von Tagen auf Stunden.

Was ist 2D-Chromatographie in der präparativen Aufreinigung?

Die 2D-Chromatographie kombiniert zwei chromatographische Aufreinigungsschritte nacheinander. Ein ausgewählter produktenthaltender Teil des Eluats aus der ersten Säule wird direkt auf eine zweite Säule übertragen, typischerweise unter Verwendung eines anderen und komplementären Trennmodus.

Auf dem Contichrom® CUBE wird dies als integrierter Batch-Prozess implementiert. Jede Dimension folgt ihrer eigenen Batch-Chromatographie-Methode, während ChromaCraft™ und ChromIQ® das Product Transfer Window, das Routing von Säule zu Säule und jede erforderliche In-line-Verdünnung steuern. Dies ermöglicht es, Workflows wie Protein-A-Capture gefolgt von Ionenaustausch-Polishing oder Anionenaustausch gefolgt von Umkehrphasen-Aufreinigung ohne einen Zwischenhalt oder manuelles Nachladen zu verbinden.

Batch- & Mehrsäulenprozesse auf dem Contichrom® CUBE:

Prozessformat	Anzahl der Aufreinigungsschritte	Transfer zwischen Säulen	Beispiel-Workflow	Methodensteuerung
Einsäulen-Batch	1	Kein Transfer zwischen Säulen	Protein-A-Capture	Eine Einsäulen-Batch-Methode
2D integrierter Batch	2	Ausgewähltes Produktfenster wird automatisch von Dimension 1 zu Dimension 2 übertragen	Protein A → IEX oder AEX → RP	Eine integrierte ChromIQ®-Methode
3D integrierter Batch	3	Automatischer sequenzieller Transfer über drei Säulenschritte	Capture → Polishing → Desalting	Eine mehrstufige ChromIQ®-Methode

Die 2D- und 3D-Konfigurationen verwenden denselben ChromaCraft™ Batch Editor wie Einsäulen-Batch-Methoden. Eine dritte Dimension erfordert die zusätzliche Säulenposition, die durch das Column Selection Valve Kit ermöglicht wird.

Integrierte 2D-Chromatographie vs. separate Batch-Schritte

Prozessfaktor	Separate Batch-Aufreinigungsschritte	Integrierte 2D-Chromatographie auf dem CUBE
Produkttransfer	Der erste Produktpool wird gesammelt und anschließend auf eine andere Säule geladen	Das ausgewählte Produktfenster wird automatisch übertragen
Zwischenhandling	Bedienerintervention und ein Zwischenbehälter sind normalerweise erforderlich	Kein manueller Transfer oder Zwischenhaltebehälter
Stream-Konditionierung	Salzkonzentration, pH-Wert oder Lösungsmittelzusammensetzung können eine Offline-Anpassung erfordern	Das Pumpennetzwerk wendet die definierte In-line-Verdünnung an
Methodenausführung	Jede Säule wird üblicherweise als separate Methode betrieben	Beide Dimensionen laufen innerhalb einer ChromIQ®-Methode
Datenprüfung	Jeder Aufreinigungsschritt erzeugt einen separaten Laufdatensatz	Beide Dimensionen erscheinen in einem kontinuierlichen Evaluation Center-Datensatz
Fraktionssammlung	Zwischen- und Endpools müssen möglicherweise separat gesammelt werden	Die Produktsammlung kann nach der finalen Dimension erfolgen

Im Gegensatz zu separaten Batch-Schritten verbindet die integrierte 2D-Chromatographie beide Aufreinigungsdimensionen innerhalb eines automatisierten Workflows. Auf dem Contichrom® CUBE kann das ausgewählte Produktfenster von Dimension 1 übertragen, durch In-line-Verdünnung konditioniert und in Dimension 2 verarbeitet werden, ohne manuelles Nachladen oder einen Zwischenhalt. Dies reduziert das Handling zwischen den Stufen, während die Methodenausführung und Datenauswertung innerhalb eines kontinuierlichen Prozessdatensatzes bleiben.

So funktioniert ein integrierter 2D/3D-Workflow.

Das Ventilnetzwerk des CUBE verbindet den Auslass der ersten Säule direkt mit dem Einlass der zweiten. Wenn die UV-Kurve der Dimension 1 das Product Transfer Window erreicht, das Sie in ChromaCraft™ festgelegt haben, leitet ChromIQ® das Eluat in Dimension 2 um und wendet eine In-line-Verdünnung im von Ihnen angegebenen Verhältnis an.

Das Transferfenster kann auf zwei Arten ausgelöst werden:

Absoluter mAU-Schwellenwert — wird bei einem festen UV-Wert ausgelöst (Peak-Front-Marker)
Relativer Prozentsatz des Peak-Maximums — wird bei einem Bruchteil der beobachteten Peakhöhe ausgelöst (Peak-Tail-Marker)

Die Pumpen passen sich automatisch an. Keine manuellen Schritte zwischen den Etappen.

Dimension 2 führt anschließend ihre eigene Äquilibrier-, Bind-, Wasch- und Elutionssequenz aus, gesteuert durch die für diese Säule definierten Methodenparameter. Beide Schritte laufen innerhalb derselben ChromIQ®-Methode.

Für 3D-Methoden fügen Sie mit dem Column Selection Valve Kit eine dritte Säulenposition hinzu — eine vollständige Capture → Polishing → Desalting-Kette in einem automatisierten Lauf.

Methodendesign mit ChromaCraft™

Schritt 1 — Derselbe Editor, erweitert für zwei oder drei Dimensionen

2D- und 3D-Methoden werden im selben ChromaCraft™ Batch Editor erstellt, der auch für Single-Column-Batch verwendet wird — keine neue Software, keine neue Oberfläche, die Sie erlernen müssen. Das Gantt-Diagramm wird erweitert, um alle Dimensionen nacheinander darzustellen. Wenn sich beide Dimensionen zu irgendeinem Zeitpunkt eine Pumpe teilen, markiert ChromaCraft™ den Konflikt sofort als rote Zone — bevor Sie die Methode generieren, nicht erst nach dem ersten fehlgeschlagenen Lauf.

Schritt 2 — Prozesstyp wählen und Ihre bestehende Methode importieren

Wählen Sie den 2D- oder 3D-Modus und weisen Sie die Puffer jeder Dimension den entsprechenden CUBE-Pumpeneinlässen zu. Jede zuvor gespeicherte Single-Column-ChromaCraft™-Methode kann direkt in Dimension 1, 2 oder 3 hochgeladen werden — alle Säulenparameter und Schrittzeiten werden importiert. Ihr bestehendes Batch-Protokoll wird sofort zu einer neuen Dimension.

Schritt 3 — Das Product Transfer Window konfigurieren

Definieren Sie UV-Trigger zum Starten und Stoppen des Säule-zu-Säule-Produkttransfers. ChromaCraft™ wählt automatisch einen Trigger für absolute mAU (Peak-Front-Marker) oder relative % des Peak-Maximums (Peak-Tail-Marker), abhängig von Start- und Endpositionen des Produkttransfers. Als Nächstes: Legen Sie den In-line-Verdünnungsfaktor fest — ChromIQ® wendet ihn während des Produkttransfers automatisch an, um das Eluat für die erneute Bindung an die nachgeschaltete Säule zu konditionieren. Optional wird eine Verzögerungszeit gesetzt, um früh eluierende Spezies daran zu hindern, den Transfer vorzeitig auszulösen.

Schritt 4 — Fraktionierungs-Trigger für die finale Dimension festlegen

Definieren Sie die Kriterien für die Produktsammlung für Dimension 2 (oder 3) — UV-Schwellenwert, Volumen-/Zeitfenster oder eine Kombination. Das Deaktivieren von „Continue after End“ beendet den Elutionsgradienten der Dimension 1 in dem Moment, in dem das Transferfenster schließt, überspringt den unnötigen Rest und geht direkt zur Regeneration über — eine spürbare Zykluszeitersparnis bei jedem Lauf.

Schritt 5 — Sonderfälle behandeln und automatisch generieren

Bei nicht mischbaren Lösungsmittelkombinationen (z. B. RP organisch → IEX wässrig) fügt ChromaCraft™ automatisch einen Wasser-Spülschritt an der Pumpe ein — kein manuelles Eingreifen erforderlich. Klicken Sie auf Speichern: Die vollständige mehrstufige ChromIQ®-Methode wird als eine einzige, sofort ausführbare Datei generiert, in der alle Dimensionen, alle Transferparameter und die Fraktionierungslogik zusammengeführt sind.

01 / 05

Ergebnisse analysieren: Das Evaluation Center

Beide Dimensionen eines 2D- oder 3D-Laufs werden im Evaluation Center in einem einzigen, kontinuierlichen Laufdatensatz erfasst. Die UV-Spur umfasst die komplette Methode — Sie sehen die Elution der Dimension 1, den Transferpunkt und das Chromatogramm der Dimension 2 (und Dimension 3) als eine einzige Zeitleiste.

Peak-Integration — automatisch oder manuell, unabhängig auf das Elutionsprofil jeder Dimension angewendet
Fraktionsanalyse — final gesammelte Fraktionen werden der vollständigen Laufspur zugeordnet; Reinheit und Ausbeute in einer Ansicht bewertet
Laufvergleich — mehrere 2D/3D-Läufe überlagern, um die Reproduzierbarkeit sowohl des Transfer-Timings als auch des finalen Produktpeaks zu bestätigen
PDF-Report-Export — vollständiger, strukturierter Bericht über alle Dimensionen hinweg, inklusive Transferparameter
Excel-/CSV-Export — vollständige Signaldaten und Integrationsergebnisse über den gesamten mehrstufigen Lauf

Das ChromIQ®-Logbuch protokolliert jedes Systemereignis — einschließlich des Product-Transfer-Window-Triggers — in einem unveränderbaren Audit-Trail mit Datenintegritäts-Prüfsummen und mehrstufiger Benutzerrechteverwaltung.

Mehrsäulen-Anwendungen

Molekülklasse	Typische 2D/3D-Konfiguration
Monoklonale Antikörper (mAbs)	2D: Protein-A-Capture → CIEX-Polishing; 3D: Protein A → CIEX → Desalting — vollständige Downstream-Kette, ein Lauf
ADCs	2D: Protein-A-Capture → HIC (DAR-Fraktionierung); oder HIC → IEX-Polishing
Rekombinante Proteine / Hormone	2D: His-Tag-IMAC → IEX-Polishing; 3D: Protein L → IEX → SEC
Peptide	2D: RP-Polishing (Dim 1) → AIEX-Polishing (Dim 2) — orthogonales Gradient-Gradient; oder RP → Desalting
Oligonukleotide	2D: AEX-Gradient → RP-Polishing; orthogonale Selektivität, ein automatisierter Lauf
AAV / Gentherapie	2D: Affinitäts-Capture → IEX-Polishing
mRNA / LNP	2D: Affinität → IEX im passenden Maßstab
Nutraceuticals / Small Molecules	2D: RP → Mixed-Mode- oder Normalphasen-Polishing

Unterstützte Schrittkombinationen auf dem Contichrom® CUBE:

Format	Schritt 1	Schritt 2	Schritt 3	Erforderliches Zubehör
2D	Isokratisch (z. B. Protein A, IMAC)	Isokratisch (z. B. SEC, Desalting)	—	Column Bypass Valve Kit
2D	Isokratisch (z. B. Protein A)	Gradient (z. B. CIEX, AEX, HIC)	—	Column Bypass Valve Kit
2D	Gradient (z. B. RP)	Gradient (z. B. AIEX)	—	Column Bypass Valve Kit + Buffer Selection Valve Kit
3D	Isokratisch	Gradient	Isokratisch (z. B. Desalting)	Column Bypass + Column Selection Valve Kits
3D	Isokratisch	Gradient	Gradient	Column Bypass + Buffer Selection + Column Selection Valve Kits

Contichrom® Systeme für 2D-integrierte Batch- und kontinuierliche Chromatographie

Alle Contichrom® Systeme führen zusätzlich zur kontinuierlichen Chromatographie auch 2D-integrierte Batch-Chromatographie durch, mit vorhersehbarer Skalierbarkeit vom CUBE bis zu den Systemlinien PILOT und TWIN. 3D-Fähigkeiten sind exklusiv für den CUBE.

Systemübersicht

Contichrom® TWIN HPLC

Produzieren Sie Peptide und Oligonukleotide im kommerziellen GMP-Maßstab. Dieses industrielle 80-bar-HPLC-System nutzt MCSGP mit AutoPeak®, um den Kompromiss zwischen Ausbeute und Reinheit zu eliminieren – dies steigert die Rückgewinnung auf >90 % bei gleichzeitig reduziertem Lösungsmittelverbrauch im Vergleich zum Batch-Verfahren. Zertifiziert nach ATEX-Zone 2 / Class I Div 2 für organische Lösungsmittel und Durchflussraten bis zu 36 L/min.

Contichrom® PILOT

Skalieren Sie die Peptid- und Oligonukleotidreinigung auf die Pilot- und klinische GMP-Produktion. Dieses 100-bar-präparative HPLC-System verfügt über MCSGP mit AutoPeak®, um den Kompromiss zwischen Ausbeute und Reinheit zu eliminieren – und liefert eine absolute Ausbeutesteigerung von +10–50 % bei Zielreinheit und deutlich weniger Lösungsmittel als Batch-HPLC. ATEX Zone 2 / Class I Div 2 zertifiziert für organische Lösungsmittel. Durchflussraten bis zu 300 mL/min.

$Contichrom CUBE system with UV detectors and FOXY fraction collector$

Contichrom® CUBE

Die unverzichtbare Plattform für die Chromatographie-Prozessentwicklung. Dieses vielseitige 100-bar-FPLC-Tischsystem führt Batch-, integrierte Batch- und kontinuierliche Chromatographie – einschließlich MCSGP und CaptureSMB – sofort einsatzbereit aus. Entwickeln Sie Reinigungsprozesse für mAbs, Peptide, Oligonukleotide, ADCs und virale Vektoren – mit verifiziertem Scale-up um über 100× auf Pilot- und Produktionssysteme.

Contichrom TWIN LPLC continuous chromatography system

Contichrom® TWIN LPLC – Einfang

Beschleunigen Sie die biopharmazeutische Capture-Chromatographie im Produktionsmaßstab. Dieses hygienische GMP-System nutzt CaptureSMB® mit AutomAb®, um die Harzausnutzung zu maximieren – und erreicht so eine bis zu 3-mal schnellere Verarbeitung und 50 % weniger Protein-A-Harz- und Pufferverbrauch im Vergleich zum Batch-Verfahren. CIP-bereites Design für mAbs, virale Vektoren, ADCs und rekombinante Proteine.

Contichrom® TWIN LPLC – Feinreinigung

Bringen Sie kontinuierliches Polishing in den biopharmazeutischen Herstellungsmaßstab. Dieses sanitäre GMP-System nutzt MCSGP mit AutoPeak®, um den Kompromiss zwischen Ausbeute und Reinheit zu eliminieren und eine Steigerung der absoluten Ausbeute um +10–50 % bei Zielreinheit zu erreichen, während der Pufferverbrauch im Vergleich zum Batch-Verfahren reduziert wird. CIP-fähiges Design für mAbs, virale Vektoren, ADCs und rekombinante Proteine.

Systemübersicht

Plattformvorteile auf einen Blick

Vorteil	Was es in der Praxis bedeutet
Keine Puffertanks zwischen den Schritten	Eluat wird automatisch von Säule zu Säule übertragen — kein Zwischenbehälter, keine manuelle Handhabung, keine Wartezeit
In-line-Verdünnung integriert	Ionenstärke- oder pH-Anpassung zwischen den Dimensionen erfolgt über das Pumpennetzwerk — kein separater Verdünnungsschritt
Ein einziger Produktpool	Fraktionssammlung erfolgt einmal, am Ende der finalen Dimension — nicht nach jedem Schritt
Reduzierter QC-Aufwand	Ein Laufdatensatz, ein Chromatogramm, ein Report — statt drei pro Downstream-Schritt
Gleiche Hardware wie im Batch	Keine zusätzliche Systemanschaffung — 2D/3D-Läufe auf dem CUBE, den Sie bereits haben, mit Zubehör-Ventilkits
Direkter Scale-up-Pfad	2D-Methoden lassen sich direkt auf die Contichrom® PILOT 300X- und TWIN-Systeme übertragen

Wie funktioniert präparative 2D-Chromatographie?

In der präparativen 2D-Chromatographie ist der Auslass der ersten Säule direkt mit einer zweiten Aufreinigungssäule verbunden. Auf dem Contichrom® CUBE überträgt ChromIQ® das ausgewählte Eluat, wenn das UV-Signal der Dimension 1 das in ChromaCraft™ definierte Product Transfer Window erreicht. Das System kann die angegebene In-line-Verdünnung während des Transfers anwenden, bevor Dimension 2 ihre eigenen Binde-, Wasch- und Elutionsschritte innerhalb derselben automatisierten Methode durchführt.

Ist präparative 2D-Chromatographie dasselbe wie umfassende 2D-LC?

Nein. Die umfassende analytische 2D-LC überträgt oder beprobt normalerweise den Effluenten der ersten Dimension wiederholt in eine schnelle Zweitdimensions-Trennung, um die analytische Peak-Kapazität zu erhöhen.

Der Contichrom®-Prozess ist ein integrierter präparativer Workflow. Er überträgt ein definiertes Produktfenster von der ersten Aufreinigungssäule auf eine zweite präparative Säule, um die Produktaufreinigung ohne Zwischenhalt oder manuelles Nachladen fortzusetzen.

Welche Hardware-Zubehörteile werden benötigt, um 2D oder 3D auf dem Contichrom® CUBE zu betreiben?

Alle 2D-Konfigurationen erfordern das Column Bypass Valve Kit, das es dem System ermöglicht, zwischen den Dimensionen zu spülen oder zu sanitieren, ohne Säulen zu demontieren. Gradient-zu-Gradient-2D-Methoden erfordern zusätzlich das Buffer Selection Valve Kit for Gradient Pump 1A & 1B, das eine unabhängige Eluentenauswahl für die Gradientenpumpe jeder Dimension ermöglicht. 3D-Methoden erfordern alles Genannte sowie das Column Selection Valve Kit, das die dritte Säulenposition ermöglicht. Alle Zubehörteile sind standardmäßig vollständig in ChromaCraft™ und ChromIQ® integriert — keine zusätzliche Konfiguration erforderlich.

Benötigt der CUBE neue Säulen oder Harze für 2D/3D?

Nein. Die in Ihrer bestehenden Batch-Methode verwendeten Säulen und Harze sind der Ausgangspunkt. Dieselbe Protein-A-Säule, die Sie für Batch-Capture verwenden, wird in einem 2D-Prozess zur Dimension 1. Ihre bestehende IEX- oder RP-Polishing-Säule wird zur Dimension 2. Für die Konfiguration einer 2D-Methode ist keine Beschaffung neuer Säulen erforderlich.

Was ist das Product Transfer Window und wie funktioniert es?

Das Product Transfer Window ist eine ChromaCraft™-Schrittkonfiguration, die die Kriterien für die Übertragung des Eluats von Dimension 1 auf Dimension 2 definiert. Sie legen einen UV-Absorptionsschwellenwert fest — wenn die UV-Spur der Dimension 1 diesen Schwellenwert während der Elution überschreitet, leitet ChromIQ® das Eluat in Dimension 2 um. Gleichzeitig wird die In-line-Verdünnung im definierten Verhältnis angewendet. Der Transfer ist vollständig automatisiert — am Umschaltpunkt ist keine manuelle Aktion erforderlich.

Muss das Eluat aus Dimension 1 vor dem Laden auf Dimension 2 verdünnt werden?

Oft ja — insbesondere bei isokratisch-zu-gradienten Transfers, bei denen der Elutionspuffer der Dimension 1 (z. B. ein Protein-A-Elutionspuffer mit niedrigem pH) nicht mit optimalen Bindebedingungen in Dimension 2 (z. B. IEX) kompatibel ist. Das Pumpennetzwerk des CUBE übernimmt dies in-line und wendet die von Ihnen im Product Transfer Window definierte Verdünnung an. Sie legen das Verhältnis fest; das System erledigt den Rest.

Kann ich nach dem Hinzufügen von 2D/3D-Zubehör-Ventilkits auf demselben CUBE weiterhin Single-Column-Batch- und kontinuierliche Prozesse fahren?

Ja. Die Zubehör-Ventilkits erweitern die Möglichkeiten, ohne bestehende Funktionalität zu entfernen. Der CUBE mit einem Column Bypass Valve Kit fährt alle Standard-1D-Batch-Modi (isokratisch, Gradient, Alternating Batch), alle 2D-integrierten Batch-Konfigurationen und alle kontinuierlichen Prozesse (CaptureSMB, MCSGP, N-Rich) auf derselben Hardware. Der Prozessmodus wird in ChromaCraft™ oder im jeweiligen Wizard ausgewählt — die Hardwarekonfiguration übernimmt den Rest.

Wie verhält sich 2D/3D-integrierter Batch zu MCSGP oder CaptureSMB?

Sie ergänzen sich, arbeiten jedoch unterschiedlich, und wichtig: Ein einzelner Contichrom® CUBE kann entweder einen Twin-Column-Continuous-Prozess (CaptureSMB, MCSGP oder N-Rich) oder einen 2D/3D-integrierten Batch-Prozess fahren — nicht beides gleichzeitig. Eine vollständige Downstream-Integration, die z. B. einen CaptureSMB-Capture-Schritt mit einer 2D-Polishing-Polishing-Kette oder einen CaptureSMB-Capture-Schritt mit MCSGP-Polishing kombiniert, wird mit zwei CUBE-Systemen erreicht, die in Serie betrieben werden — mit viraler Inaktivierung oder einem anderen erforderlichen Hold-Schritt dazwischen. Diese Architektur vereint die Vorteile sowohl kontinuierlichen Capture als auch mehrstufigen automatisierten Polishings über eine vollständige Downstream-Kette hinweg.

Kann die 2D/3D-Methode auf größere Systeme übertragen werden?

Ja für 2D, nein für 3D. Auf dem Contichrom® CUBE entwickelte 2D-Methoden lassen sich direkt auf den Contichrom® PILOT 300X (bis zu 300 mL/min) sowie auf die TWIN LPLC- und HPLC-Produktionssysteme übertragen. Dieselbe ChromIQ®-Methodenlogik, Product Transfer Window-Parameter und In-line-Verdünnungsverhältnisse gelten auch im größeren Säulenmaßstab – keine Methoden-Neuentwicklung erforderlich. 3D-Methoden werden auf den größeren Systemen nicht nativ unterstützt, obwohl kundenspezifische Lösungen möglich sind – bitte fragen Sie an.

Ein System. Zwei oder drei Aufreinigungsschritte.

CUBE-Miete buchen Systemangebot anfordern