GENTHERAPIE

AAV-Aufreinigung: Trennung von leeren und vollen Kapsiden mit MCSGP

Kontinuierliches AIEX-Polishing für volle Kapside.

Verbessern Sie die AAV-Aufreinigung, indem Sie die vollen Kapside zurückgewinnen, die bei der Batch-AIEX in überlappenden Seitenfraktionen verworfen werden. Veröffentlicht für AAV2 von zwei unabhängigen Forschungsgruppen: 5× höhere Ausbeute an vollen Kapsiden | 2,5× Produktivität | 3× geringere Prozessmassenintensität. Entwickeln Sie auf dem Contichrom® CUBE und übertragen Sie das Verfahren für die Herstellung auf den TWIN LPLC.

Müller et al., Biotechnol. Bioeng., 2025; Grob et al., J. Chromatogr. A, 2025 (unabhängige AAV2 AEX-Studien)

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AAV viral vector purification — illustration

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Wie die AAV-Aufreinigung funktioniert: Vom Capture bis zum Polishing

Ein chromatographiebasierter AAV-Aufreinigungsprozess umfasst in der Regel die Klärung des Harvests, Konzentrierung und Pufferwechsel, Affinitäts-Capture sowie Polishing. Die Affinitätschromatographie konzentriert den viralen Vektor und entfernt viele prozessbedingte Verunreinigungen, während das AEX-Polishing genomhaltige volle Kapside von leeren Kapsiden trennt.

Die MCSGP-Technologie von ChromaCon adressiert die hochauflösende Polishing-Stufe durch kontinuierliches Recycling überlappender Fraktionen aus leeren/vollen Kapsiden. CaptureSMB wird ebenfalls für das kontinuierliche AAV-Affinitäts-Capture entwickelt, sodass Capture- und Polishing-Methoden auf derselben Contichrom®-Plattform evaluiert werden können.

Der AAV-Downstream-Engpass: Leere Kapside

Adeno-assoziierte Viren (AAV) sind die führende Vektorplattform in der Gentherapie – mit mehreren zugelassenen Produkten (Luxturna®, Zolgensma®, Hemgenix®, Roctavian®, Elevidys®) und über 130 laufenden klinischen Studien. Doch die Herstellung rekombinanter AAV in den für die klinische und kommerzielle Versorgung erforderlichen Ausbeuten und Qualitäten bleibt eine entscheidende Herausforderung.

Ein kritisches Problem ist der hohe Anteil leerer Kapside in jeder AAV-Ernte. Leere Kapside – identisch in Größe und Form mit vollen, Genom-enthaltenden Kapsiden, aber ohne therapeutische DNA – machen routinemäßig 50–95 % der gesamten viralen Partikel in Rohmaterial aus. Sie sind therapeutisch inaktiv und können bei hohen Konzentrationen Immunreaktionen auslösen und die Dosisbelastung für den Patienten erhöhen.

Leere und volle AAV-Kapside sind in Größe und Oberflächenchemie nahezu identisch und unterscheiden sich nur geringfügig im isoelektrischen Punkt – was bedeutet, dass sie in der Anionenaustauschchromatographie über eine schmale, überlappende Zone koeluieren. Die Ausbeute an vollen Kapsiden bei Verwendung der Batch-AEX-Chromatographie kann sehr gering sein, was viel Raum für die Optimierung des Polierschritts lässt.

Die Lösung: MCSGP mit AutoPeak® zur Anreicherung voller AAV-Kapside

MCSGP (Multi-column Countercurrent Solvent Gradient Purification) löst den Ausbeute-Reinheit-Zielkonflikt, der das Batch-AEX-Polishing von AAV so verschwenderisch macht. Zwei identische Säulen arbeiten in einem kontinuierlichen Gegenstrommodus – dabei werden die überlappenden leeren/vollen Kapsidfraktionen, die bei der Batch-Chromatographie verworfen werden, recycelt. Der Prozess verwendet die gleichen AEX-Harze, Puffer und Gradientenbedingungen wie Ihre bestehende Batch-AAV-Methode – diese Bedingungen sind der Ausgangspunkt für die MCSGP-Prozessentwicklung.

Die dynamische Prozesskontrolle AutoPeak® überwacht das AAV-Elutionsprofil in Echtzeit über das UV260/280-Absorptionsverhältnis – ein zuverlässiger Online-Indikator für die Übergangszone zwischen leeren und vollen Kapsiden – und passt die Recycling- und Sammelfenster automatisch an, um eine robuste, unbeaufsichtigte Anreicherung voller Kapside zu gewährleisten.

Gleiches Harz. Gleiche Puffer. Überlegene Leistung. MCSGP funktioniert mit den AEX-Harzen und Gradientenmethoden, die bereits für Ihren AAV-Serotyp validiert sind – Capto Q, POROS HQ, Fractogel TMAE oder andere. Das Online-UV260/280-Verhältnis liefert ein reagenzfreies PAT-Signal für den Übergang von leer zu voll, wodurch AutoPeak® eine konsistente Anreicherung voller Kapside von Lauf zu Lauf ermöglicht, selbst wenn die upstream-Verhältnisse von leer zu voll schwanken.

Erfahren Sie mehr über MCSGP + AutoPeak®

Continuous chromatography - MCSGP — illustration

Ergebnisse der AAV-Aufreinigung: MCSGP vs. Batch-AEX

5×

Höhere Ausbeute an vollen Kapsiden

2,5×

Höhere Produktivität

3×

Geringere Prozessmassenintensität (PMI)

30 % → 68 %

Anreicherung voller Kapside

Fallstudie 1: Proof-of-Concept MCSGP-Anreicherung von vollen AAV2-Kapsiden

Einstellung: AAV2-Reinigung aus HEK293-Zelllysat mittels Anionenaustauschchromatographie. Ausgangsmaterial mit einem anspruchsvollen Verhältnis von leeren/vollen Kapsiden.

Batch-AEX-Ausgangspunkt:

Gehalt an vollen Kapsiden: ~30 % (ddPCR) / ~27 % (cryo-TEM)
Produktverlust in Seitenfraktionen: signifikant – volle Kapside mit geringer Ausbeute zurückgewonnen

MCSGP-Ergebnis (6 Zyklen, gleiche AEX-Bedingungen):

Gehalt an vollen Kapsiden: 68 % (ddPCR) / 61 % (cryo-TEM) – mehr als eine Verdoppelung der Reinheit voller Kapside
Rückgewinnung voller Kapside: wesentlich höher als bei Batch – Ausbeute-Reinheit-Zielkonflikt überwunden
Online-UV260/280-Verhältnisüberwachung: erfolgreiche Identifizierung der Übergangszone zwischen leeren und vollen Kapsiden in Echtzeit; bestätigt durch Offline-Multi-Angle Light Scattering (MALS) und cryo-TEM

Wichtigstes Ergebnis: Die MCSGP-Prozessentwicklung beginnt mit Ihrer validierten Batch-AEX-Methode – Harz, Puffer und Gradientenbedingungen bleiben erhalten. Das Online-UV260/280-Verhältnis liefert ein praktisches, reagenzfreies PAT-Signal, das für die AutoPeak®-Integration geeignet ist. Beide analytischen Techniken (ddPCR und cryo-TEM) bestätigten die Anreicherung – wodurch das UV-Verhältnis als zugängliches Prozessüberwachungstool für den Gehalt an vollen/leeren Kapsiden validiert wurde.

Müller, J. et al. Biotechnol. Bioeng. (2025). PubMed: 40468522

Fallstudie 2: Modellbasierte Entwicklung und Implementierung von MCSGP zur AAV2-Trennung von leeren/vollen Kapsiden

Einstellung: AAV2-Reinigung mittels Anionenaustauschchromatographie, Reinheitsspezifikation (Pspec) = 70,0 % volle Kapside.

Batch-AEX-Baseline:

Ausbeute: ~10–11 % volle Kapside bei 70 % Reinheit
Produktivität: 3,85×10¹³ VP/(L_Harz·h) mit 20 CV-Gradient
Flache Gradienten (30 CV) verbessern die Ausbeute leicht (auf 11,3 %), reduzieren aber die Produktivität drastisch – ein schwieriger Kompromiss

MCSGP-Ergebnis (gleiches AEX-Harz, gleiche Pspec):

Ausbeute: 57,8 % – ungefähr 5-fach höher als Batch
Produktivität: 8,65×10¹³ VP/(L_Harz·h) – ungefähr 2,5-fach höher als der produktivitätsoptimierte Batch-Fall
Prozessmassenintensität (PMI): reduziert auf 1/3 von Batch – 3-fache Reduzierung des Pufferverbrauchs
Sowohl hohe Ausbeute als auch hohe Produktivität gleichzeitig erreicht – der Kompromiss eliminiert

Wichtigstes Ergebnis: MCSGP ist die einzige Technik, die gleichzeitig Ausbeute, Produktivität und Nachhaltigkeitsmetriken für die AAV-Trennung von leeren/vollen Kapsiden verbessert. Die Studie validierte die MCSGP-Leistung durch modellbasiertes Prozessdesign, wodurch der experimentelle Aufwand für den Methodentransfer erheblich reduziert wurde.

J. Chromatogr. A (2025). DOI: 10.1016/j.chroma.2025.465001

CaptureSMB für kontinuierliche AAV-Affinitätsaufreinigung (demnächst verfügbar)

Für AAV-Programme, die kommerzielle Affinitätsharze verwenden (POROS CaptureSelect AAVX, AAV8, AAV9; Capto AVB; AVIPure®), erweitert CaptureSMB die zweisäulige periodische Gegenstromchromatographie auf den Aufreinigungsschritt – das gleiche Prinzip, das eine 2,5-fache Protein-A-Produktivität für mAbs liefert.

Im CaptureSMB-Modus arbeiten zwei Affinitätssäulen in einem koordinierten, miteinander verbundenen und parallelen Zyklus. Die erste Säule wird über ihren Single-Pass-Durchbruchpunkt hinaus beladen; jeder Durchbruch wird auf der zweiten Säule in Reihe aufgefangen. Dies überwindet eine zentrale Herausforderung der AAV-Affinitätsaufreinigung: geringe dynamische Bindungskapazität im Verhältnis zur großen Kapsidgröße (~25 nm) begrenzt die Harznutzung bei konventioneller Batch-Beladung.

Potenzielle Vorteile für die AAV-Affinitätsaufreinigung:

Höhere Harznutzung – Beladung über den Durchbruchpunkt hinaus ohne Produktverlust
Höhere Produktivität pro Säulenvolumen – relevant angesichts der hohen Kosten spezieller AAV-Affinitätsharze
Reduzierter Pufferverbrauch – weniger Äquilibrierungszyklen pro aufgefangenem Gramm
Geringerer Säulen-Footprint – wichtig in GMP-Umgebungen mit begrenztem Platz

CaptureSMB für die AAV-Affinitätsaufreinigung befindet sich in aktiver Entwicklung. Kontaktieren Sie unsere Anwendungsspezialisten für eine Machbarkeitsbewertung. Der CUBE unterstützt sowohl CaptureSMB als auch MCSGP und ist somit die ideale Plattform für die Entwicklung und den Vergleich beider Schritte auf demselben Instrument.

AAV-Aufreinigung: Batch-AEX vs. MCSGP

Parameter	Batch AEX	MCSGP (Contichrom)
Ausbeute an vollen Kapsiden (bei 70 % Reinheitsspezifikation)	~10–11 %	~58 % (+5×)
Produktivität	3,85×10¹³ VP/(L_Harz·h)	8,65×10¹³ VP/(L_Harz·h) (+2,5×)
Prozessmassenintensität (Puffer)	Baseline	3-fach geringer
Anreicherung voller Kapside	Begrenzt durch Center-Cut	30 % → 68 % (ddPCR)
Ausbeute-Reinheit-Zielkonflikt	Harte Einschränkung – kann nicht beides verbessern	Eliminiert
Prozesskontinuität	Batch-Zyklen, Leerlaufzeiten	Kontinuierlich, 24/7
Harz-/Methodenwechsel	Aktuelle validierte Methode	Gleiches Harz, gleicher Gradient
Online-Überwachung (PAT)	Nur Offline-Analytik	UV260/280-Verhältnis – Echtzeit
Kompensation der Prozessvariabilität	Manuelle Re-Optimierung	AutoPeak® automatische Anpassung

💡 Wie MCSGP die Ausbeute und Produktivität der AAV-Aufreinigung verbessert

Bei der Batch-AEX reduziert die Verlängerung des Gradienten zur Rückgewinnung weiterer voller Kapside die Produktivität proportional – die beiden Ziele sind grundsätzlich gegensätzlich. MCSGP löst dies durch das Recycling der überlappenden Fraktionen, wodurch beide unabhängig voneinander maximiert werden können. Dies ist besonders kritisch für AAV, wo der Upstream-Gehalt an leeren Kapsiden von Natur aus variabel und oft unvorhersehbar ist – eine Herausforderung, an die sich AutoPeak® in Echtzeit kontinuierlich anpasst.

AAV-Aufreinigungssysteme von der Entwicklung bis zur GMP-Herstellung

Alle Systeme betreiben MCSGP und CaptureSMB mit UV260/280-Verhältnisüberwachung zur Detektion von leeren/vollen Kapsiden. Methoden skalieren vorhersehbar vom CUBE → TWIN LPLC.

Systemübersicht

$Contichrom CUBE system with UV detectors and FOXY fraction collector$

Contichrom® CUBE

Die unverzichtbare Plattform für die Chromatographie-Prozessentwicklung. Dieses vielseitige 100-bar-FPLC-Tischsystem führt Batch-, integrierte Batch- und kontinuierliche Chromatographie – einschließlich MCSGP und CaptureSMB – sofort einsatzbereit aus. Entwickeln Sie Reinigungsprozesse für mAbs, Peptide, Oligonukleotide, ADCs und virale Vektoren – mit verifiziertem Scale-up um über 100× auf Pilot- und Produktionssysteme.

Contichrom TWIN LPLC continuous chromatography system

Contichrom® TWIN LPLC – Einfang

Beschleunigen Sie die biopharmazeutische Capture-Chromatographie im Produktionsmaßstab. Dieses hygienische GMP-System nutzt CaptureSMB® mit AutomAb®, um die Harzausnutzung zu maximieren – und erreicht so eine bis zu 3-mal schnellere Verarbeitung und 50 % weniger Protein-A-Harz- und Pufferverbrauch im Vergleich zum Batch-Verfahren. CIP-bereites Design für mAbs, virale Vektoren, ADCs und rekombinante Proteine.

Contichrom® TWIN LPLC – Feinreinigung

Bringen Sie kontinuierliches Polishing in den biopharmazeutischen Herstellungsmaßstab. Dieses sanitäre GMP-System nutzt MCSGP mit AutoPeak®, um den Kompromiss zwischen Ausbeute und Reinheit zu eliminieren und eine Steigerung der absoluten Ausbeute um +10–50 % bei Zielreinheit zu erreichen, während der Pufferverbrauch im Vergleich zum Batch-Verfahren reduziert wird. CIP-fähiges Design für mAbs, virale Vektoren, ADCs und rekombinante Proteine.

Systemübersicht

MCSGP-Anwendungen in der AAV-Reinigung

Anwendungsfall 1 — AAV2-Aufreinigung durch Polishing (AEX)

Der am gründlichsten publizierte Serotyp für die MCSGP-basierte Trennung von leeren/vollen Kapsiden. Zwei unabhängige Veröffentlichungen aus dem Jahr 2025 zeigten eine 5-fache Verbesserung der Ausbeute an vollen Kapsiden und einen 2,5-fachen Produktivitätsgewinn im Vergleich zur Batch-AEX. Direkt anwendbar auf jedes AAV2-Programm, das derzeit AEX-Polishing verwendet.

Anwendungsfall 2 — MCSGP-Entwicklung für AAV5, AAV8, AAV9 und andere Serotypen

MCSGP ist auf jeden Serotyp anwendbar, für den eine AEX-Gradientenmethode zumindest eine teilweise Trennung von leeren/vollen Kapsiden erreicht. Die CUBE-Entwicklungsplattform ermöglicht ein schnelles Methodenscreening und eine Anpassung für neue Serotypen ohne veröffentlichte Trenndaten.

Anwendungsfall 3 — AAV-Aufreinigung für variable Upstream-Feeds

Die AAV-Verhältnisse von leeren/vollen Kapsiden variieren von Charge zu Charge je nach Zellsystem, Transfektionseffizienz und Serotyp. AutoPeak® kompensiert dies in Echtzeit mithilfe des UV260/280-Verhältnisses – so wird eine konsistente Ausbeute an vollen Kapsiden ohne manuelle Re-Optimierung zwischen den Läufen gewährleistet.

Anwendungsfall 4 — Integriertes AAV-Affinitäts-Capture + AEX-Polishing

Für Programme, die Pan-AAV-Affinitätsharze verwenden, ersetzt oder ergänzt MCSGP das Batch-AEX-Polishing. Eine komplette zweistufige kontinuierliche Chromatographielösung, die für das breiteste Spektrum an AAV-Programmen anwendbar ist.

Erste Schritte mit MCSGP für die AAV-Gentherapie

Sehen Sie sich die Contichrom®-Plattform an, bevor Sie sich festlegen. Bewerten Sie die MCSGP-Eignung für Ihre AAV-AEX-Trennung rechnerisch anhand Ihrer vorhandenen Batch-Daten und der UV260/280-Fraktionsanalyse. Entwickeln Sie Ihre kontinuierliche Methode auf einem Contichrom CUBE mit integrierter Unterscheidung von leeren/vollen Kapsiden und skalieren Sie dann auf den TWIN LPLC für die GMP-Produktion.

Zuerst erleben – Kostenlose Demo oder Webinar

Noch nicht vertraut mit der Contichrom®-Plattform? Beginnen Sie hier. YMC ChromaCon bietet kostenlose Demonstrationen und einführende Webinare, die auf Ihr Team zugeschnitten sind – kein Ausgangsmaterial, keine Verpflichtung erforderlich.

Vor Ort in Zürich (halber Tag, 2–4 Stunden): Sehen Sie den CUBE persönlich, führen Sie ChromIQ® live aus, besprechen Sie Ihre AAV-Kapsid-Trennungsherausforderung mit den Anwendungswissenschaftlern von YMC ChromaCon
Remote-Webinar (1–3 Stunden): interaktive Live-Session über MCSGP, CaptureSMB, N-Rich, ChromIQ®-Software und das gesamte Contichrom®-Ökosystem
Sitzungen können sich auf MCSGP für die AEX-basierte Trennung von leeren/vollen Kapsiden und das AutoPeak® UV260/280 PAT-Kontrollkonzept konzentrieren

→ Fordern Sie eine kostenlose Demo oder ein Einführungs-Webinar an

Modellierungsbewertung für AAV

Prognostizieren Sie die MCSGP-Leistung bei Ihrer AAV-AEX-Trennung, bevor Sie neue Experimente durchführen. YMC ChromaCon bewertet die Anwendbarkeit und schätzt die erwartete Verbesserung der Kapsidausbeute anhand Ihrer vorhandenen Batch-Daten.

Senden Sie Ihr Einzelsäulen-AEX-Batch-Chromatogramm, Gradient, Harz und Säulendimensionen – zusammen mit UV260/280-Absorptionsdaten aus Ihren Batch-Fraktionen
YMC ChromaCon bestätigt die MCSGP-Anwendbarkeit für Ihren Serotyp, schätzt die erwartete Verbesserung der Depletion leerer Kapside und identifiziert wichtige Prozessparameter für Ihre Reinheitsspezifikation
Daten können von jedem HPLC- oder FPLC-System stammen – kein Contichrom® erforderlich
Typischer Zeitrahmen: 3–5 Wochen nach Erhalt der Daten; kein Materialversand erforderlich

→ MCSGP Prozessmodellierungsdienst

Entwicklung im Labormaßstab – Mieten oder Kaufen Sie einen CUBE

Die MCSGP-Methodenentwicklung wird auf dem Contichrom CUBE unter Verwendung Ihres vorhandenen AEX-Harz- und Puffersystems durchgeführt. Verfügbar zur Miete oder zum Kauf.

Der ChromIQ® MCSGP Wizard erstellt den anfänglichen MCSGP-Betriebspunkt aus Ihrem Batch-AEX-Chromatogramm und den UV260/280-Fraktionsdaten
AutoPeak® wird unter Verwendung des Online-UV260/280-Absorptionsverhältnisses als PAT-Signal für die Übergangszone zwischen leeren und vollen Kapsiden konfiguriert – dies ermöglicht eine Echtzeit- und automatisierte Unterscheidung leerer Kapside ohne Offline-Analytik zwischen den Läufen
Die Entwicklung ist typischerweise in wenigen Tagen experimenteller Arbeit abgeschlossen; kein iteratives Batch-Screening erforderlich
Die Upstream-Affinitätsaufreinigung kann auch als CaptureSMB auf demselben CUBE entwickelt werden, wodurch ein durchgängiger kontinuierlicher Downstream-Workflow ermöglicht wird

→ Contichrom CUBE Mietprogramm

→ Einen Contichrom CUBE kaufen

Skalierung auf GMP-Produktion – Contichrom TWIN LPLC

Die auf dem CUBE entwickelte MCSGP-Methode wird direkt auf den TWIN LPLC für die AAV-Produktion im Herstellungsmaßstab übertragen. ChromaCon bietet Skalierungsberatung und GMP-Dokumentationsunterstützung.

TWIN LPLC Polishing für kontinuierliche MCSGP-basierte Trennung von leeren/vollen Kapsiden im Produktionsmaßstab – die AutoPeak® UV260/280-Kontrolllogik wird von der CUBE-Entwicklung übernommen
TWIN LPLC Capture für die Upstream-Affinitätsaufreinigung (falls zutreffend), wodurch ein durchgängiger kontinuierlicher Downstream-Prozess auf derselben Plattformfamilie ermöglicht wird
Parameter skalieren vorhersehbar – Säulenchemie, Gradientenbedingungen und AutoPeak®-Kontrolllogik bleiben im Maßstab erhalten
GMP-Dokumentationsunterstützung (IQ/OQ/PQ) und Skalierungsberatung für behördliche Einreichungen verfügbar

→ Scale-up-Beratung und Training

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Wie fügt sich MCSGP in einen AAV-Aufreinigungsprozess ein?

MCSGP wird primär während der AEX-Polishing-Stufe der AAV-Aufreinigung eingesetzt. Nachdem das Affinitäts-Capture den Vektor konzentriert und viele prozessbedingte Verunreinigungen entfernt hat, trennt MCSGP überlappende Populationen von leeren und vollen Kapsiden, während Fraktionen recycelt werden, die bei der herkömmlichen Batch-AEX verworfen würden.

Kann MCSGP leere und volle AAV-Kapside von anderen Serotypen als AAV2 trennen?

Ja – MCSGP ist auf jeden Serotyp anwendbar, bei dem die AEX-Gradientenchromatographie zumindest eine teilweise Trennung von leeren/vollen Kapsiden erreicht. Ein veröffentlichter Proof-of-Concept liegt für AAV2 vor (Müller et al. 2025; Grob et al. 2025). Der Contichrom CUBE ermöglicht eine schnelle Methodenanpassung an AAV5, AAV8, AAV9 und modifizierte Kapsidvarianten.

Benötigt MCSGP ein anderes Harz- oder Puffersystem als meine aktuelle AEX-Polishing-Methode?

Nein. MCSGP verwendet das gleiche Anionenaustauschharz, Puffer und Gradientenbedingungen wie Ihre bestehende validierte Batch-AEX-Methode. Der Übergang von Batch zu MCSGP erfordert lediglich die Übertragung des Batch-Gradienten in eine MCSGP-Betriebsstrategie – die Anwendungsspezialisten von ChromaCon unterstützen dies als Teil der standardmäßigen Machbarkeitsbewertung.

Wie überwacht AutoPeak® den Übergang zwischen leeren und vollen Kapsiden während MCSGP?

AutoPeak® verwendet das Echtzeit-UV260/280-Absorptionsverhältnis als primäres PAT-Signal. Leere Kapside haben ein niedrigeres UV260/280-Verhältnis als volle Kapside. Wenn die Elution die gemischte Zone durchläuft, erkennt AutoPeak® die Verschiebung online und definiert automatisch die Grenzen des Recyclingfensters – bestätigt durch cryo-TEM und Multi-Angle Light Scattering (Müller et al. 2025).

Welche Reinheit und Ausbeute an vollen Kapsiden kann ich von MCSGP erwarten?

Bei einer Reinheitsspezifikation von 70 % vollen Kapsiden erreichte MCSGP eine Ausbeute von ~58 % gegenüber ~10–11 % bei Batch – eine Verbesserung um das ~5-fache (Grob et al. 2025). Ausgehend von 30 % vollen Kapsiden erreichten Müller et al. (2025) einen Gehalt von 68 % vollen Kapsiden. Die erwarteten Ergebnisse für Ihr Programm hängen vom Ausgangsmaterial und der Zielreinheit ab; die Machbarkeitsbewertung von ChromaCon liefert molekülspezifische Prognosen.

Wie viele MCSGP-Zyklen sind erforderlich und wie lange dauert ein Lauf?

In Müller et al. (2025) wurden 6 MCSGP-Zyklen zur Erzielung der berichteten Anreicherung verwendet. Die Anzahl der Zyklen und die Laufzeit hängen vom Feedvolumen, der Säulengröße, der Gradientenlänge und der Zielreinheit ab. Die Methodenentwicklung auf dem Contichrom CUBE dauert typischerweise ein bis wenige Tage. Die Dauer der Batch-Produktion im Herstellungsmaßstab wird im Rahmen einer Machbarkeitsstudie modelliert.

Gibt es eine Spezifikation für das Verhältnis von leeren/vollen Kapsiden, die ich für die behördliche Einreichung erfüllen muss?

Die FDA-Richtlinien und ICH Q6B fordern die Charakterisierung des Kapsidgehalts als kritisches Qualitätsmerkmal. Viele Programme zielen auf ≥90 % volle Kapside im endgültigen Arzneimittel ab. MCSGP mit AutoPeak® ermöglicht eine reproduzierbare Anreicherung voller Kapside aus variablen Upstream-Feeds – dies unterstützt direkt die Chargenkonsistenz und die Einhaltung behördlicher Vorschriften.

Kann dasselbe Contichrom-System sowohl MCSGP-Polishing als auch CaptureSMB-Capture durchführen?

Ja. Sowohl der CUBE als auch der TWIN LPLC unterstützen MCSGP und CaptureSMB auf derselben Hardware, umschaltbar über die ChromIQ®-Software. Ein einziges Instrument deckt die Entwicklung der Affinitätsaufreinigung (CaptureSMB) und die Polishing-Entwicklung (MCSGP) ab – dies ermöglicht eine vollständig integrierte kontinuierliche zweistufige Reinigungsstrategie.

Welche Skalierungsoptionen gibt es für die klinische und kommerzielle AAV-Herstellung?

Der Contichrom TWIN LPLC deckt den klinischen bis kommerziellen Maßstab ab (Säulenvolumina von 100 mL bis 2 L). Die Skalierung vom CUBE zum TWIN LPLC ist linear – Säulenchemie, Gradientenbedingungen und AutoPeak®-Kontrolllogik bleiben erhalten. cGMP-Design, 21 CFR Part 11-Konformität und IQ/OQ/PQ-Dokumentationspakete sind verfügbar.