{"id":16999,"date":"2025-11-17T11:34:29","date_gmt":"2025-11-17T10:34:29","guid":{"rendered":"https:\/\/www.chromacon.com\/technologies\/polissage-continu-mcsgp\/"},"modified":"2026-08-31T14:26:25","modified_gmt":"2026-08-31T12:26:25","slug":"polissage-continu-mcsgp","status":"publish","type":"technology","link":"https:\/\/www.chromacon.com\/fr\/technologies\/polissage-continu-mcsgp\/","title":{"rendered":"Polissage continu (MCSGP)"},"content":{"rendered":"
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\n POLISSAGE BICOLONNE <\/p>\n \n

\n Chromatographie MCSGP : Polissage continu <\/span>\n <\/h1>\n \n
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R\u00e9cup\u00e9rez ce que la chromatographie par lots laisse derri\u00e8re elle.<\/strong><\/p>\n

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La chromatographie MCSGP est un processus HPLC pr\u00e9paratif \u00e0 deux colonnes qui \u00e9limine le compromis puret\u00e9-rendement dans le polissage en phase inverse et par \u00e9change d\u2019ions \u2014 m\u00eame r\u00e9sine, m\u00eames tampons, aucun changement chimique.<\/span><\/p>\n

Avec le contr\u00f4le dynamique de processus AutoPeak\u00ae, la MCSGP offre une reproductibilit\u00e9 de qualit\u00e9 fabrication sur la plateforme Contichrom\u00ae, valid\u00e9e \u00e0 l\u2019\u00e9chelle GMP dans la fabrication de peptides et d\u2019oligonucl\u00e9otides.<\/p>\n

Valid\u00e9 sur 4 s\u00e9ries PPQ : 99,2 %<\/strong> de puret\u00e9 | \u221296 %<\/strong> de contr\u00f4les en cours de processus | 235 h<\/strong> de fonctionnement sans surveillance | +9 %<\/strong> de gain de rendement<\/p>\n

Source : Eisenhuth & M\u00fcller-Sp\u00e4th, Processes 2025 (campagne PPQ Bivalirudine Bachem, acc\u00e8s libre)<\/em><\/strong><\/p>\n<\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n\n

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\n Demander un webinaire<\/span><\/a><\/span> <\/div>\n
\n T\u00e9l\u00e9charger l\u2019article PPQ<\/span><\/a><\/span> <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n\n
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\n Demander un webinaire<\/span><\/a><\/span> <\/div>\n
\n T\u00e9l\u00e9charger l\u2019article PPQ<\/span><\/a><\/span> <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n
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\n Pourquoi la chromatographie par lots impose un compromis puret\u00e9-rendement <\/h2>\n \n
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Chaque \u00e9tape de polissage par gradient est confront\u00e9e \u00e0 la m\u00eame contrainte. Une coupe centrale \u00e9troite permet d\u2019atteindre la puret\u00e9 cible \u2014 mais elle rejette le produit dans les fractions pr\u00e9coces et tardives qui flanquent le pic. L\u2019\u00e9largissement de la coupe r\u00e9cup\u00e8re ce produit \u2014 mais ne respecte pas la sp\u00e9cification de puret\u00e9. Le stockage des fractions lat\u00e9rales et leur retraitement avec des cycles par lots suppl\u00e9mentaires n\u2019am\u00e9liorent le rendement qu\u2019\u00e0 un co\u00fbt \u00e9norme : cela multiplie les \u00e9tapes de manipulation, la charge analytique, la consommation de tampon et le temps de campagne. <\/span><\/p>\n

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Il ne s\u2019agit pas d\u2019un \u00e9chec de d\u00e9veloppement de m\u00e9thode. C\u2019est une limitation inh\u00e9rente \u00e0 la chromatographie par lots sur une seule colonne. Lorsque votre produit et ses impuret\u00e9s s\u2019\u00e9ludent de mani\u00e8re rapproch\u00e9e, aucune strat\u00e9gie de fractionnement ne peut maximiser simultan\u00e9ment la puret\u00e9 et le rendement sur une seule colonne. <\/span><\/p>\n <\/div>\n \n <\/div>\n\n

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\n Comment la MCSGP \u00e9limine le compromis <\/h2>\n \n
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La MCSGP (purification par gradient de solvant \u00e0 contre-courant multicolonne) n\u2019optimise pas la coupe \u2014 elle \u00e9limine le compromis en recyclant continuellement les fractions lat\u00e9rales impures plut\u00f4t qu\u2019en les rejetant.<\/span><\/p>\n

Deux colonnes identiques fonctionnent dans un processus cyclique coordonn\u00e9. Pendant qu\u2019une colonne \u00e9lue, l\u2019autre se r\u00e9g\u00e9n\u00e8re et charge un nouvel \u00e9chantillon en parall\u00e8le. Les fractions impures \u00e0 \u00e9lution pr\u00e9coce et tardive \u2014 les coupes lat\u00e9rales que les processus par lots collectent, regroupent, stockent et retraitent \u2014 sont plut\u00f4t transf\u00e9r\u00e9es directement de la premi\u00e8re colonne \u00e0 la seconde avec une dilution en ligne, pr\u00eates \u00e0 \u00eatre r\u00e9adsorb\u00e9es et res\u00e9par\u00e9es lors du prochain basculement. Le produit ne quitte jamais le syst\u00e8me \u00e0 moins d\u2019\u00eatre pur. Le r\u00e9sultat est qu\u2019un rendement \u00e9lev\u00e9 et une puret\u00e9 \u00e9lev\u00e9e sont atteints simultan\u00e9ment, dans un processus continu automatis\u00e9. <\/span><\/p>\n

\u00c9tant donn\u00e9 que la MCSGP fonctionne avec le m\u00eame gradient que votre \u00e9tape de polissage par lots existante, il n\u2019y a aucun changement de r\u00e9sine, de tampons ou de composition d\u2019\u00e9luant. Votre m\u00e9thode par lots est le point de d\u00e9part. <\/span><\/p>\n

Les gains de performance sont quantifi\u00e9s \u00e0 travers de multiples applications industrielles valid\u00e9es. Bachem AG et Bristol Myers Squibb ont tous deux publi\u00e9 des r\u00e9sultats sur des applications peptidiques et prot\u00e9iques. <\/span><\/p>\n <\/div>\n \n <\/div>\n\n

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\n 10\u201350 % <\/h3>\n \n

\n Augmentation absolue du rendement \u00e0 la puret\u00e9 cible
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\n 75 % \u2193 <\/h3>\n \n

\n R\u00e9duction de solvant par rapport au processus par lots
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\n Z\u00e9ro <\/h3>\n \n

\n Cycles de re-chromatographie, le recyclage interne remplace le regroupement
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\n 5 jours \u2192 24 h <\/h3>\n \n

\n Temps de campagne (API peptidique), Bachem, \u00e9chelle de production GMP
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Chromatographie MCSGP vs HPLC par lots : Comparaison des performances<\/h2>\n\n\n
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Les avantages en termes de rendement et de co\u00fbt de la purification par gradient de solvant \u00e0 contre-courant multicolonne par rapport \u00e0 la chromatographie par lots conventionnelle sur une seule colonne sont quantifi\u00e9s sur plusieurs campagnes de fabrication GMP. <\/span><\/p>\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n
M\u00e9trique<\/strong><\/td>\nHPLC par lots<\/strong><\/td>\nChromatographie MCSGP<\/strong><\/td>\n<\/tr>\n
Rendement \u00e0 la puret\u00e9 cible<\/td>\nR\u00e9f\u00e9rence<\/td>\nAugmentation absolue de +10\u201350 %<\/td>\n<\/tr>\n
Consommation de solvant<\/td>\nR\u00e9f\u00e9rence<\/td>\n\u221275 %<\/td>\n<\/tr>\n
Cycles de re-chromatographie<\/td>\nN\u00e9cessaire pour les fractions lat\u00e9rales<\/span><\/td>\nZ\u00e9ro \u2014 recyclage interne<\/span><\/td>\n<\/tr>\n
Temps de campagne (API peptidique)<\/td>\n5 jours<\/span><\/td>\n24 heures<\/span><\/td>\n<\/tr>\n
Contr\u00f4les en cours de processus<\/td>\nR\u00e9f\u00e9rence<\/span><\/td>\n\u221296 %<\/span><\/td>\n<\/tr>\n
Fonctionnement sans surveillance<\/td>\nLimit\u00e9<\/span><\/td>\n235 h en continu<\/span><\/td>\n<\/tr>\n<\/tbody>\n<\/table>\n

Fabrication d\u2019API peptidique Bachem AG<\/a>, Eisenhuth, R. ; M\u00fcller-Sp\u00e4th, T. Processes, 2025, (Acc\u00e8s libre)<\/a>, Weldon, R. et al. J. Chromatogr. A, 2022 (Acc\u00e8s libre). <\/a> Weldon, R. et al. Org. Process Res. Dev., 2025 (Acc\u00e8s libre).<\/a><\/em><\/p>\n\n \n <\/div> <\/div>\n<\/div>\n

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\n Comment fonctionne la chromatographie MCSGP : Le cycle en quatre phases <\/h2>\n \n
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Chaque cycle MCSGP se compose de deux commutations, avec une \u00e9lution de chaque colonne par cycle. Au sein d\u2019une commutation, quatre phases s\u2019ex\u00e9cutent en s\u00e9quence : <\/span><\/p>\n\n\n\n\n\n\n\n\n
Phase<\/th>\nColonne amont<\/th>\nColonne aval<\/th>\n<\/tr>\n<\/thead>\n
P1 \u2013 D\u00e9but de l\u2019\u00e9lution<\/strong><\/td>\nGradient d\u00e9marr\u00e9 ; impuret\u00e9 faiblement adsorbante (W) \u00e9limin\u00e9e<\/td>\nR\u00e9g\u00e9n\u00e9ration termin\u00e9e ; pr\u00e9paration au chargement<\/td>\n<\/tr>\n
P2 \u2013 Recyclage faible<\/strong><\/td>\nColonnes interconnect\u00e9es ; fractions pr\u00e9coces de faible puret\u00e9 (W\/P) transf\u00e9r\u00e9es vers la colonne aval avec dilution en ligne pour r\u00e9adsorption<\/td>\nRe\u00e7oit la fraction W\/P recycl\u00e9e + lie le produit<\/td>\n<\/tr>\n
P3 \u2013 Collecte du produit<\/strong><\/td>\nProduit pur (P) de coupe centrale collect\u00e9<\/td>\nNouvel \u00e9chantillon charg\u00e9<\/td>\n<\/tr>\n
P4 \u2013 Recyclage fort<\/strong><\/td>\nFractions tardives de faible puret\u00e9 (P\/S) transf\u00e9r\u00e9es vers la colonne aval avec dilution en ligne pour r\u00e9adsorption<\/td>\nRe\u00e7oit la fraction P\/S recycl\u00e9e + lie le produit<\/td>\n<\/tr>\n<\/tbody>\n<\/table>\n

\u00c0 la fin de la commutation, les deux colonnes \u00e9changent leurs positions par commutation de vannes \u2014 sans mouvement physique \u2014 et le cycle se r\u00e9p\u00e8te. Le processus atteint un \u00e9tat d\u2019\u00e9quilibre cyclique en 1 \u00e0 2 cycles, moment auquel la qualit\u00e9 et le rendement du produit sont constants d\u2019un cycle \u00e0 l\u2019autre. <\/span><\/p>\n

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La dilution en ligne pendant les phases de recyclage (P2 et P4) abaisse la force \u00e9luotropique de la fraction transf\u00e9r\u00e9e, garantissant que le produit recycl\u00e9 se r\u00e9adsorbe sur la colonne aval plut\u00f4t que de la traverser. Le facteur de dilution est calcul\u00e9 automatiquement par l\u2019assistant MCSGP \u00e0 partir du chromatogramme par lots. <\/span><\/p>\n

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Le principe du processus MCSGP (.pptx)<\/p>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/section>\n\n<\/section>

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Conception de m\u00e9thode avec l\u2019assistant MCSGP<\/h2>\n

Les m\u00e9thodes MCSGP sont con\u00e7ues dans l\u2019assistant MCSGP<\/strong> de ChromIQ\u00ae 9 \u2014 une interface \u00e0 onglets qui prend un chromatogramme par lots du Contichrom\u00ae CUBE et vous guide vers une m\u00e9thode compl\u00e8te et pr\u00eate \u00e0 l\u2019emploi.<\/p>\n <\/div>\n \n

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\n \u00c9tape 1 \u2014 Chargez le chromatogramme par lots et saisissez les donn\u00e9es de fraction <\/h3>\n
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Chargez l\u2019ex\u00e9cution de conception par lots sur une seule colonne du CUBE directement dans l\u2019assistant. S\u00e9lectionnez le canal UV \u00e0 utiliser pour le r\u00e9glage des limites de phase. Saisissez les donn\u00e9es de puret\u00e9 et de concentration issues de l\u2019analyse de fraction hors ligne de l\u2019ex\u00e9cution par lots (facultatif mais fortement recommand\u00e9). L\u2019assistant affiche le rendement, la puret\u00e9 et la perte de produit par lots pr\u00e9dits en fonction du chromatogramme charg\u00e9 comme r\u00e9f\u00e9rence. <\/p>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n

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\n \u00c9tape 2 \u2014 D\u00e9finissez les limites de section par glisser-d\u00e9poser <\/h3>\n
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Faites glisser cinq marqueurs de limite verticaux sur le chromatogramme par lots pour d\u00e9finir les quatre zones MCSGP : d\u00e9but du recyclage faible (t2), d\u00e9but de la collecte du produit (t3), fin de la collecte du produit (t4) et fin du recyclage fort (t5). L\u2019assistant met \u00e0 jour le rendement, la puret\u00e9 et la perte de produit pr\u00e9dits en temps r\u00e9el lorsque vous d\u00e9placez les marqueurs \u2014 aucun calcul manuel n\u2019est requis. Les exigences de dilution en ligne pour les phases de recyclage sont calcul\u00e9es automatiquement \u00e0 partir des positions des limites. <\/p>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n

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\n \"AutoPeak <\/div>\n\n \n
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\n \u00c9tape 3 \u2014 Configurez le lavage, la r\u00e9g\u00e9n\u00e9ration et AutoPeak\u00ae <\/h3>\n
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D\u00e9finissez les \u00e9tapes de lavage et de r\u00e9g\u00e9n\u00e9ration de la colonne dans l\u2019onglet Lavage et r\u00e9g\u00e9n\u00e9ration<\/strong>. Activez le contr\u00f4le de processus AutoPeak\u00ae dans l\u2019onglet \u00ab Contr\u00f4le de processus AutoPeak \u00bb<\/strong> \u2014 chacune des quatre transitions de phase (t2\u2013t5) peut \u00eatre activ\u00e9e ind\u00e9pendamment. Pour les premi\u00e8res ex\u00e9cutions de d\u00e9veloppement avec des conditions bien d\u00e9finies, un timing fixe est suffisant. Pour la mise \u00e0 l\u2019\u00e9chelle et les campagnes de fabrication prolong\u00e9es, AutoPeak\u00ae est essentiel pour maintenir un rendement et une puret\u00e9 constants \u00e0 mesure que les conditions varient. Voir Contr\u00f4le dynamique de processus \u2192<\/a> pour un guide de configuration complet. <\/p>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n

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\n \u00c9tape 4 \u2014 Examinez la pr\u00e9diction des performances et g\u00e9n\u00e9rez <\/h3>\n
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L\u2019onglet Param\u00e8tres de m\u00e9thode et performances<\/strong> affiche les performances de processus pr\u00e9dites \u2014 productivit\u00e9 (g\/L\/h), besoin en solvant (L\/g), chargement de colonne (g\/L) et concentration du pool \u2014 avant d\u2019initier l\u2019ex\u00e9cution MCSGP. D\u00e9finissez le nombre de cycles pour la m\u00e9thode principale et examinez les volumes de tampon par entr\u00e9e de pompe. Cliquez sur Enregistrer : l\u2019assistant g\u00e9n\u00e8re un package de m\u00e9thode complet comprenant les m\u00e9thodes de d\u00e9marrage, principale, d\u2019arr\u00eat et de nettoyage, ainsi qu\u2019un fichier de proc\u00e9dure qui les charge dans la s\u00e9quence correcte. Ouvrez la proc\u00e9dure dans ChromIQ\u00ae et ex\u00e9cutez la MCSGP. <\/p>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n\n \n

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\n 01<\/span>\n \/ <\/span>\n 04<\/span>\n <\/div>\n\n \n