{"id":17597,"date":"2025-12-03T13:36:47","date_gmt":"2025-12-03T12:36:47","guid":{"rendered":"https:\/\/www.chromacon.com\/applications\/vecteurs-viraux-aav\/"},"modified":"2026-09-19T22:58:38","modified_gmt":"2026-09-19T20:58:38","slug":"vecteurs-viraux-aav","status":"publish","type":"application","link":"https:\/\/www.chromacon.com\/fr\/applications\/vecteurs-viraux-aav\/","title":{"rendered":"Vecteurs viraux (AAV)"},"content":{"rendered":"
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\n TH\u00c9RAPIE G\u00c9NIQUE <\/p>\n \n

\n Purification d’AAV : s\u00e9parez les capsides vides et pleines avec MCSGP<\/span>\n <\/h1>\n \n
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Polissage AIEX continu pour les capsides pleines.<\/strong><\/p>\n

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Am\u00e9liorez la purification d’AAV en r\u00e9cup\u00e9rant les capsides pleines que l’AIEX en mode discontinu rejette dans les fractions lat\u00e9rales qui se chevauchent. Publi\u00e9 sur l’AAV2 par deux groupes de recherche ind\u00e9pendants : 5 fois plus de rendement en capsides pleines<\/strong> | 2,5 fois plus de productivit\u00e9<\/strong> | 3 fois moins d’intensit\u00e9 massique du processus<\/strong>. D\u00e9veloppez sur le Contichrom\u00ae CUBE et transf\u00e9rez-le au TWIN LPLC pour la fabrication. <\/span><\/p>\n

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M\u00fcller et al., Biotechnol. Bioeng., 2025 ; Grob et al., J. Chromatogr. A, 2025 (\u00e9tudes ind\u00e9pendantes AAV2 AEX)<\/em><\/strong><\/p>\n

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\n Parler \u00e0 un sp\u00e9cialiste<\/span><\/a><\/span> <\/div>\n
\n Lisez le dernier article sur l'AAV2<\/span><\/a><\/span> <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n\n
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\n \"AAV <\/div>\n\n \n
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\n Parler \u00e0 un sp\u00e9cialiste<\/span><\/a><\/span> <\/div>\n
\n Lisez le dernier article sur l'AAV2<\/span><\/a><\/span> <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/section>
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\n Comment fonctionne la purification d'AAV : de la capture au polissage <\/h2>\n \n
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Un processus de purification d’AAV bas\u00e9 sur la chromatographie comprend g\u00e9n\u00e9ralement la clarification de la r\u00e9colte, la concentration et l’\u00e9change de tampon, la capture par affinit\u00e9 et le polissage. La chromatographie d’affinit\u00e9 concentre le vecteur viral et \u00e9limine de nombreuses impuret\u00e9s li\u00e9es au processus, tandis que le polissage AEX s\u00e9pare les capsides pleines contenant le g\u00e9nome des capsides vides.<\/span><\/p>\n

La technologie MCSGP de ChromaCon aborde l’\u00e9tape de polissage \u00e0 haute r\u00e9solution en recyclant en continu les fractions de capsides vides\/pleines qui se chevauchent. CaptureSMB est \u00e9galement en cours de d\u00e9veloppement pour la capture d’affinit\u00e9 continue d’AAV, permettant d’\u00e9valuer les m\u00e9thodes de capture et de polissage sur la m\u00eame plateforme Contichrom\u00ae.<\/span><\/p>\n <\/div>\n \n <\/div>\n\n

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\n Le goulot d'\u00e9tranglement en aval de l'AAV : les capsides vides <\/h2>\n \n
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Le virus ad\u00e9no-associ\u00e9 (AAV) est la principale plateforme de vecteurs en th\u00e9rapie g\u00e9nique \u2014 avec plusieurs produits approuv\u00e9s (Luxturna\u00ae, Zolgensma\u00ae, Hemgenix\u00ae, Roctavian\u00ae, Elevidys\u00ae) et plus de 130 essais cliniques en cours. Mais la fabrication d’AAV recombinants aux rendements et \u00e0 la qualit\u00e9 n\u00e9cessaires pour l’approvisionnement clinique et commercial reste un d\u00e9fi majeur. <\/p>\n

Un probl\u00e8me critique est la proportion \u00e9lev\u00e9e de capsides vides<\/strong> dans chaque r\u00e9colte d’AAV. Les capsides vides \u2014 identiques en taille et en forme aux capsides pleines contenant le g\u00e9nome, mais d\u00e9pourvues d’ADN th\u00e9rapeutique \u2014 repr\u00e9sentent r\u00e9guli\u00e8rement 50 \u00e0 95 % du total des particules virales dans le mat\u00e9riel brut. Elles sont th\u00e9rapeutiquement inactives et, \u00e0 des niveaux \u00e9lev\u00e9s, peuvent d\u00e9clencher des r\u00e9ponses immunitaires et augmenter la charge de dosage pour le patient. <\/p>\n

Les capsides d’AAV vides et pleines sont presque identiques en taille et en chimie de surface, ne diff\u00e9rant que l\u00e9g\u00e8rement par leur point iso\u00e9lectrique \u2014 ce qui signifie qu’elles co-\u00e9luent sur une zone \u00e9troite et chevauchante en chromatographie d’\u00e9change d’anions. Le rendement en capsides pleines en utilisant la chromatographie AEX en mode discontinu peut \u00eatre tr\u00e8s faible, laissant une grande marge d’optimisation de l’\u00e9tape de polissage. <\/p>\n <\/div>\n \n <\/div>\n\n

\n \"AAV \n <\/div>\n <\/div>\n <\/section>\n\n<\/div><\/section>
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\n La solution : MCSGP avec AutoPeak\u00ae pour l'enrichissement en capsides pleines d'AAV <\/h2>\n \n
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Le MCSGP (Multi-column Countercurrent Solvent Gradient Purification) r\u00e9sout le compromis rendement-puret\u00e9 qui rend le polissage AEX discontinu d’AAV si inefficace. Deux colonnes identiques fonctionnent en mode continu \u00e0 contre-courant \u2014 recyclant les fractions de capsides vides\/pleines qui se chevauchent et que la chromatographie discontinue rejette. Le processus utilise les m\u00eames r\u00e9sines AEX, tampons et conditions de gradient<\/strong> que votre m\u00e9thode AAV discontinue existante \u2014 ces conditions sont le point de d\u00e9part du d\u00e9veloppement du processus MCSGP. <\/p>\n

Le contr\u00f4le dynamique du processus AutoPeak\u00ae surveille le profil d’\u00e9lution d’AAV en temps r\u00e9el via le rapport d’absorbance UV260\/280 \u2014 un indicateur en ligne fiable de la zone de transition capsides vides\/pleines \u2014 ajustant automatiquement les fen\u00eatres de recyclage et de collecte pour maintenir un enrichissement robuste et autonome en capsides pleines.<\/p>\n

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M\u00eame r\u00e9sine. M\u00eames tampons. Performances sup\u00e9rieures.<\/strong> Le MCSGP fonctionne avec les r\u00e9sines AEX et les m\u00e9thodes de gradient d\u00e9j\u00e0 valid\u00e9es pour votre s\u00e9rotype AAV \u2014 Capto Q, POROS HQ, Fractogel TMAE ou autres. Le rapport UV260\/280 en ligne fournit un signal PAT sans r\u00e9actif pour la transition vide\/plein, permettant \u00e0 AutoPeak\u00ae de fournir un enrichissement constant en capsides pleines d’une s\u00e9rie \u00e0 l’autre, m\u00eame lorsque les rapports vide\/plein en amont fluctuent. <\/p>\n<\/blockquote>\n <\/div>\n \n En savoir plus sur MCSGP + AutoPeak\u00ae<\/span><\/a><\/span> <\/div>\n\n

\n \"Continuous \n <\/div>\n <\/div>\n <\/section>\n\n<\/section>\n

R\u00e9sultats de purification d’AAV : MCSGP vs AEX discontinu<\/h2>\n\n
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\n 5\u00d7 <\/p>\n \n

\n Rendement en capsides pleines plus \u00e9lev\u00e9 <\/p>\n \n \n <\/div>\n\n<\/div>\n\n <\/div><\/section><\/div>\n\n\n\n

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\n 2,5\u00d7 <\/p>\n \n

\n Productivit\u00e9 plus \u00e9lev\u00e9e
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\n 3\u00d7 <\/p>\n \n

\n Intensit\u00e9 massique du processus (PMI) plus faible
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\n 30 % \u2192 68 % <\/p>\n \n

\n Enrichissement en capsides pleines
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\u00c9tudes de cas de purification d'AAV avec MCSGP<\/h2>\n <\/div>\n \n
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