{"id":7423,"date":"2025-11-17T11:34:29","date_gmt":"2025-11-17T10:34:29","guid":{"rendered":"https:\/\/www.chromacon.com\/technologies\/kontinuierliche-polierung-mcsgp\/"},"modified":"2026-05-12T14:57:41","modified_gmt":"2026-05-12T12:57:41","slug":"kontinuierliche-polierung-mcsgp","status":"publish","type":"technology","link":"https:\/\/www.chromacon.com\/de\/technologien\/kontinuierliche-polierung-mcsgp\/","title":{"rendered":"Kontinuierliche Polierung (MCSGP)"},"content":{"rendered":"
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\n ZWEIS\u00c4ULEN-POLISHING <\/p>\n \n

\n MCSGP<\/strong> Continuous-Polishing-Chromatographie\n <\/h1>\n \n
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Zur\u00fcckgewinnen, was die Batch-Chromatographie zur\u00fcckl\u00e4sst.<\/strong> MCSGP ist das zweikolonnige pr\u00e4parative HPLC-Verfahren, das den Zielkonflikt zwischen Reinheit und Ausbeute bei der Polishing-Chromatographie in der Umkehrphasen- und Ionenaustausch-Chromatographie aufl\u00f6st \u2013 gleiches Harz, gleiche Puffer, keine \u00c4nderung der Chemie. Mit der dynamischen Prozessregelung AutoPeak\u00ae liefert MCSGP Reproduzierbarkeit in Produktionsqualit\u00e4t auf der Contichrom\u00ae-Plattform, im GMP-Ma\u00dfstab f\u00fcr die Peptid- und Oligonukleotidherstellung validiert. <\/p>\n

Validiert \u00fcber 4 PPQ-L\u00e4ufe: 99,2%<\/strong> Reinheit | \u221296%<\/strong> In-Prozess-Kontrollen | 235 h<\/strong> unbeaufsichtigter Betrieb | +9%<\/strong> Ausbeutesteigerung<\/p>\n

Quelle: Eisenhuth & M\u00fcller-Sp\u00e4th, Processes 2025 (Bachem Bivalirudin PPQ-Kampagne, Open Access)<\/em><\/strong><\/p>\n<\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n\n

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\n Der Kompromiss zwischen Reinheit und Ausbeute <\/h2>\n \n
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Jeder Gradienten-Polierungsschritt unterliegt derselben Einschr\u00e4nkung. Ein enger Mittelschnitt erreicht die Zielreinheit \u2013 verwirft jedoch Produkt in den fr\u00fchen und sp\u00e4ten Fraktionen, die den Peak flankieren. Eine Verbreiterung des Schnitts gewinnt dieses Produkt zur\u00fcck \u2013 verfehlt jedoch die Reinheitsspezifikation. Die Lagerung von Seitenfraktionen und deren Wiederaufarbeitung durch zus\u00e4tzliche Batch-L\u00e4ufe verbessert die Ausbeute nur zu enormen Kosten: Sie vervielfacht Handhabungsschritte, analytischen Aufwand, Pufferverbrauch und Kampagnendauer. <\/p>\n

Dies ist kein Fehler in der Methodenentwicklung. Es ist eine inh\u00e4rente Limitierung der Eins\u00e4ulen-Batch-Chromatographie. Wenn Ihr Produkt und seine Verunreinigungen eng eluieren, kann keine Fraktionierungsstrategie gleichzeitig sowohl Reinheit als auch Ausbeute auf einer einzelnen S\u00e4ule maximieren. <\/p>\n <\/div>\n \n <\/div>\n\n

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\n MCSGP ver\u00e4ndert die Randbedingung <\/h2>\n \n
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MCSGP (Multi-column Counter-current Solvent Gradient Purification) optimiert nicht den Schnitt \u2013 es eliminiert den Kompromiss, indem die unreinen Seitenfraktionen kontinuierlich rezykliert werden, anstatt sie zu verwerfen.<\/p>\n

Zwei identische S\u00e4ulen arbeiten in einem koordinierten zyklischen Prozess. W\u00e4hrend eine S\u00e4ule eluiert, regeneriert die andere und bel\u00e4dt parallel frisches Ausgangsmaterial. Die fr\u00fch eluierenden und sp\u00e4t eluierenden unreinen Fraktionen \u2013 die Seitenschnitte, die Batch-Prozesse sammeln, poolen, lagern und wiederaufarbeiten \u2013 werden stattdessen direkt von der ersten S\u00e4ule zur zweiten S\u00e4ule mit In-line-Verd\u00fcnnung \u00fcbertragen, bereit zur Re-Adsorption und erneuten Trennung im n\u00e4chsten Wechsel. Produkt verl\u00e4sst das System nur, wenn es rein ist. Das Ergebnis ist, dass hohe Ausbeute und hohe Reinheit gleichzeitig in einem kontinuierlichen automatisierten Prozess erreicht werden. <\/p>\n

Da MCSGP mit demselben Gradienten wie Ihr bestehender Batch-Polierungsschritt arbeitet, gibt es keine \u00c4nderung bei Harz, Puffern oder Eluentenzusammensetzung. Ihre Batch-Methode ist der Ausgangspunkt. <\/p>\n

Die Leistungsgewinne sind \u00fcber mehrere validierte industrielle Anwendungen quantifiziert. Sowohl Bachem AG als auch Bristol Myers Squibb haben Ergebnisse \u00fcber Peptid- und Proteinanwendungen ver\u00f6ffentlicht. <\/p>\n <\/div>\n \n <\/div>\n\n

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\n 10\u201350 % <\/h2>\n \n

\n Absolute Ausbeutesteigerung bei Zielreinheit
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\n \u2193 75 % <\/h2>\n \n

\n L\u00f6sungsmittelreduktion vs. Batch-Prozess
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\n Null <\/h2>\n \n

\n Re-Chromatographie-L\u00e4ufe, internes Recycling ersetzt Pooling
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\n 5 Tage \u2192 24 h <\/h2>\n \n

\n Kampagnendauer (Peptid-API), Bachem, GMP-Produktionsma\u00dfstab
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Bachem AG Peptid-API-Herstellung<\/a>, Eisenhuth, R.; M\u00fcller-Sp\u00e4th, T. Processes, 2025, (Open Access)<\/a>, Weldon, R. et al. J. Chromatogr. A, 2022 (Open Access). <\/a> Weldon, R. et al. Org. Process Res. Dev., 2025 (Open Access).<\/a><\/em><\/p>\n\n \n <\/div> <\/div>\n<\/div>\n

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\n Funktionsweise von MCSGP <\/h2>\n \n
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Jeder MCSGP-Zyklus besteht aus zwei Wechseln, mit einer Elution von jeder S\u00e4ule pro Zyklus. Innerhalb eines Wechsels laufen vier Phasen nacheinander ab: <\/p>\n\n\n\n\n\n\n\n\n
Phase<\/th>\nVorgeschaltete S\u00e4ule<\/th>\nNachgeschaltete S\u00e4ule<\/th>\n<\/tr>\n<\/thead>\n
P1 – Elutionsstart<\/strong><\/td>\nGradient gestartet; schwach adsorbierende Verunreinigung (W) entfernt<\/td>\nRegeneration abgeschlossen; Vorbereitung f\u00fcr Beladung<\/td>\n<\/tr>\n
P2 – Schwaches Recycling<\/strong><\/td>\nS\u00e4ulen verbunden; fr\u00fche Fraktionen niedriger Reinheit (W\/P) mit In-line-Verd\u00fcnnung zur Downstream-S\u00e4ule zur Re-Adsorption \u00fcbertragen<\/td>\nEmpf\u00e4ngt rezyklierte W\/P-Fraktion + bindet Produkt<\/td>\n<\/tr>\n
P3 – Produktsammlung<\/strong><\/td>\nReiner Produkt-Mittelschnitt (P) gesammelt<\/td>\nFrisches Ausgangsmaterial beladen<\/td>\n<\/tr>\n
P4 – Starkes Recycling<\/strong><\/td>\nSp\u00e4te Fraktionen niedriger Reinheit (P\/S) mit In-line-Verd\u00fcnnung zur Downstream-S\u00e4ule zur Re-Adsorption \u00fcbertragen<\/td>\nEmpf\u00e4ngt rezyklierte P\/S-Fraktion + bindet Produkt<\/td>\n<\/tr>\n<\/tbody>\n<\/table>\n

Am Ende des Wechsels tauschen die beiden S\u00e4ulen durch Ventilschaltung ihre Positionen \u2013 keine physische Bewegung \u2013 und der Zyklus wiederholt sich. Der Prozess erreicht innerhalb von 1\u20132 Zyklen einen zyklischen Steady State, ab dem Produktqualit\u00e4t und Ausbeute von Zyklus zu Zyklus konsistent sind. <\/p>\n

Die In-line-Verd\u00fcnnung w\u00e4hrend der Recycling-Phasen (P2 und P4) senkt die eluotrope St\u00e4rke der \u00fcbertragenen Fraktion und stellt sicher, dass das rezyklierte Produkt auf der Downstream-S\u00e4ule re-adsorbiert, anstatt durchzulaufen. Der Verd\u00fcnnungsfaktor wird automatisch vom MCSGP-Assistenten aus dem Batch-Chromatogramm berechnet. <\/p>\n

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Das MCSGP-Prozessprinzip (.pptx)<\/p>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/section>\n\n<\/section>

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Methodenentwicklung mit dem MCSGP-Assistenten<\/h2>\n

MCSGP-Methoden werden im MCSGP-Assistenten<\/strong> in ChromIQ\u00ae 9 entwickelt \u2013 einer registerkartenbasierten Oberfl\u00e4che, die ein Batch-Chromatogramm vom Contichrom\u00ae CUBE \u00fcbernimmt und Sie zu einer vollst\u00e4ndigen, ausf\u00fchrbaren Methode f\u00fchrt.<\/p>\n <\/div>\n \n

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\n Schritt 1 \u2013 Batch-Chromatogramm laden und Fraktionsdaten eingeben <\/h3>\n
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Laden Sie den Eins\u00e4ulen-Batch-Designlauf vom CUBE direkt in den Assistenten. W\u00e4hlen Sie den UV-Kanal f\u00fcr die Phasengrenzeinstellung. Geben Sie Reinheits- und Konzentrationsdaten aus der Offline-Fraktionsanalyse des Batch-Laufs ein (optional, aber dringend empfohlen). Der Assistent zeigt vorhergesagte Batch-Ausbeute, Reinheit und Produktverlust basierend auf dem geladenen Chromatogramm als Referenz an. <\/p>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n

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\n Schritt 2 \u2013 Abschnittsgrenzen per Drag-and-Drop definieren <\/h3>\n
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Ziehen Sie f\u00fcnf vertikale Grenzmarkierungen auf dem Batch-Chromatogramm, um die vier MCSGP-Zonen zu definieren: Start des schwachen Recyclings (t2), Start der Produktsammlung (t3), Ende der Produktsammlung (t4) und Ende des starken Recyclings (t5). Der Assistent aktualisiert vorhergesagte Ausbeute, Reinheit und Produktverlust in Echtzeit, w\u00e4hrend Sie die Markierungen bewegen \u2013 keine manuelle Berechnung erforderlich. Die In-line-Verd\u00fcnnungsanforderungen f\u00fcr die Recycling-Phasen werden automatisch aus den Grenzpositionen berechnet. <\/p>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n

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\n Schritt 3 \u2013 Waschen, Regeneration und AutoPeak\u00ae konfigurieren <\/h3>\n
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Legen Sie die Schritte f\u00fcr die S\u00e4ulenw\u00e4sche und Regeneration auf der Registerkarte W\u00e4sche & Regeneration<\/strong> fest. Aktivieren Sie die AutoPeak\u00ae-Prozesssteuerung auf der Registerkarte \u201eAutoPeak Process Control\u201c<\/strong> \u2013 jeder der vier Phasen\u00fcberg\u00e4nge (t2\u2013t5) kann unabh\u00e4ngig voneinander aktiviert werden. F\u00fcr fr\u00fche Entwicklungsl\u00e4ufe mit klar definierten Bedingungen ist eine feste Zeitsteuerung ausreichend. F\u00fcr Scale-up und ausgedehnte Produktionskampagnen ist AutoPeak\u00ae unerl\u00e4sslich, um eine gleichbleibende Ausbeute und Reinheit zu gew\u00e4hrleisten, wenn sich die Bedingungen \u00e4ndern. Eine vollst\u00e4ndige Konfigurationsanleitung finden Sie unter Dynamische Prozesssteuerung \u2192<\/a>. <\/p>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n

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\n Schritt 4 \u2013 Leistungsvorhersage \u00fcberpr\u00fcfen und generieren <\/h3>\n
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Das Register Methodeneinstellungen & Leistung<\/strong> zeigt die vorhergesagte Prozessleistung \u2013 Produktivit\u00e4t (g\/L\/h), L\u00f6sungsmittelbedarf (L\/g), S\u00e4ulenbeladung (g\/L) und Poolkonzentration \u2013 vor Initiierung des MCSGP-Laufs. Legen Sie die Anzahl der Zyklen f\u00fcr die Hauptmethode fest und \u00fcberpr\u00fcfen Sie die Puffervolumina pro Pumpeneinlass. Klicken Sie auf Speichern: Der Assistent generiert ein vollst\u00e4ndiges Methodenpaket einschlie\u00dflich Startup-, Haupt-, Shutdown- und Clean-Methoden sowie eine Prozedurdatei, die diese in der richtigen Reihenfolge l\u00e4dt. \u00d6ffnen Sie die Prozedur in ChromIQ\u00ae und f\u00fchren Sie MCSGP aus. <\/p>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n <\/div>\n\n \n

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