{"id":16635,"date":"2026-08-27T11:18:33","date_gmt":"2026-08-27T09:18:33","guid":{"rendered":"https:\/\/www.chromacon.com\/articles\/kontinuierliche-anionenaustausch-aufreinigung-einer-konjugierten-sirna\/"},"modified":"2026-09-01T11:06:14","modified_gmt":"2026-09-01T09:06:14","slug":"kontinuierliche-anionenaustausch-aufreinigung-einer-konjugierten-sirna","status":"publish","type":"articles","link":"https:\/\/www.chromacon.com\/de\/artikel\/kontinuierliche-anionenaustausch-aufreinigung-einer-konjugierten-sirna\/","title":{"rendered":"Kontinuierliche Anionenaustausch-Aufreinigung einer konjugierten siRNA"},"content":{"rendered":"\n<!-- Research Highlight \u2014 siRNA Purification by AIEX MCSGP \u2014 v1.0 -->\n<style>\n        \/* ==========================================\n           CSS VARIABLES - Customize your fonts\/colors here\n           ========================================== *\/\n        :root {\n            \/* Colors - modify these to match your WordPress theme *\/\n      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      Everything below is new and uses the same tokens.\n           ========================================================== *\/\n\n        :root {\n            \/* Figure colors follow the article's own figures: black and blue for the\n               pilot and downscaled batch traces in Figure 3A, red for the MCSGP product\n               collection window in Figure 4B. Literal hex is repeated in the SVG because\n               presentation attributes cannot read CSS custom properties. *\/\n            --fig-batch-pilot: #2D3748;\n            --fig-batch-downscale: #2E75B6;\n            --fig-mcsgp: #C0392B;\n\n            --color-green: #1b7a4b;        \/* green eluent \/ MCSGP *\/\n            --color-green-light: #e2efe7;\n            --color-flag: #c0392b;         \/* conventional ACN-TFA pool *\/\n            --color-flag-light: #f8e3dd;\n            --color-cyan-light: #dcedf4;   \/* weak-side recycling *\/\n            --font-mono: ui-monospace, SFMono-Regular, Menlo, Consolas, monospace;\n        }\n\n        \/* MOBILE OVERFLOW FIX\n           .article-main is a flex item, so its default min-width:auto prevents it\n           from shrinking below the intrinsic width of its widest child. The results\n           table is ~620px min-content, which pushed the whole page to 684px on a\n           360px screen. min-width:0 lets the flex item shrink; the table then\n           scrolls inside .table-scroll instead of stretching the document. *\/\n        .article-main {\n            min-width: 0;\n        }\n\n        \/* Eyebrow above the hero headline *\/\n        .article-hero .eyebrow {\n            font-size: 0.75rem;\n            text-transform: uppercase;\n            letter-spacing: 0.12em;\n            font-weight: 600;\n            color: var(--color-accent-light);\n            margin: 0 0 var(--space-sm);\n        }\n\n        \/* Headline figures *\/\n        .stats-grid {\n            display: grid;\n            grid-template-columns: repeat(2, 1fr);\n            gap: var(--space-sm);\n            margin: var(--space-lg) 0;\n        }\n\n        @media (min-width: 768px) {\n            .stats-grid {\n                grid-template-columns: repeat(4, 1fr);\n            }\n        }\n\n        .stat-card {\n            background: var(--color-bg-alt);\n            border: 1px solid var(--color-border);\n            border-radius: 0.75rem;\n            padding: var(--space-md);\n        }\n\n        .stat-value {\n            font-family: var(--font-heading);\n            font-size: 2rem;\n            font-weight: 700;\n            line-height: 1.1;\n            color: var(--color-primary);\n        }\n\n        .stat-value.is-green {\n            color: var(--color-green);\n        }\n\n        .stat-value span {\n            font-size: 1rem;\n            font-weight: 600;\n        }\n\n        .stat-label {\n            font-size: 0.8rem;\n            line-height: 1.45;\n            color: var(--color-text-light);\n            margin-top: var(--space-xs);\n        }\n\n        \/* Interactive process explorer *\/\n        .explorer {\n            background: var(--color-bg);\n            border: 1px solid var(--color-border);\n            border-radius: 1rem;\n            padding: var(--space-md);\n            margin: var(--space-lg) 0;\n        }\n\n        @media (min-width: 768px) {\n            .explorer {\n                padding: var(--space-lg);\n            }\n        }\n\n        .explorer-tabs {\n            display: flex;\n            flex-wrap: wrap;\n            gap: var(--space-xs);\n            margin-bottom: var(--space-md);\n        }\n\n        .explorer-tab {\n            flex: 1 1 180px;\n            background: var(--color-bg-alt);\n            border: 1px solid var(--color-border);\n            border-radius: 0.5rem;\n            padding: 0.6rem 0.9rem;\n            font-family: inherit;\n            font-size: 0.95rem;\n            font-weight: 600;\n            line-height: 1.25;\n            color: var(--color-text-light);\n            text-align: left;\n            cursor: pointer;\n            transition: all 0.2s ease;\n        }\n\n        .explorer-tab small {\n            display: block;\n            font-size: 0.75rem;\n            font-weight: 400;\n            margin-top: 2px;\n            opacity: 0.85;\n        }\n\n        .explorer-tab:hover {\n            border-color: var(--color-accent);\n            color: var(--color-primary);\n        }\n\n        .explorer-tab[aria-pressed=\"true\"] {\n            background: var(--color-primary);\n            border-color: var(--color-primary);\n            color: white;\n        }\n\n        .plot-scroll {\n            max-width: 100%;\n        }\n\n        .explorer-plot {\n            width: 100%;\n            height: auto;\n            display: block;\n        }\n\n        \/* On phones the 760-unit viewBox scales the 11px labels down to ~5px.\n           Hold a legible minimum and let the plot scroll inside its own box\n           instead; the figures below the chart carry the same numbers. *\/\n        @media (max-width: 700px) {\n            .plot-scroll {\n                overflow-x: auto;\n                -webkit-overflow-scrolling: touch;\n            }\n            .explorer-plot { min-width: 620px; }\n        }\n\n        .explorer-plot text {\n            font-family: var(--font-mono);\n            font-size: 11px;\n        }\n\n        .explorer-plot .trace {\n            fill: none;\n            stroke: var(--color-text);\n            stroke-width: 2.2;\n            stroke-linejoin: round;\n            stroke-linecap: round;\n        }\n\n        .explorer-plot .axis {\n            stroke: var(--color-text);\n            stroke-width: 1.2;\n        }\n\n        .explorer-plot .grid-line {\n            stroke: var(--color-border);\n            stroke-width: 1;\n        }\n\n        .explorer-state {\n            opacity: 0;\n            transition: opacity 0.35s ease;\n        }\n\n        .explorer-state.is-on {\n            opacity: 1;\n        }\n\n        .explorer-legend {\n            display: flex;\n            flex-wrap: wrap;\n            gap: var(--space-md);\n            list-style: none;\n            padding: 0;\n            margin: var(--space-sm) 0 0;\n            font-size: 0.8rem;\n            color: var(--color-text-light);\n        }\n\n        .explorer-legend li {\n            display: flex;\n            align-items: center;\n            gap: 0.4rem;\n        }\n\n        .explorer-legend i {\n            width: 14px;\n            height: 14px;\n            border-radius: 3px;\n            border: 1px solid rgba(0,0,0,0.12);\n        }\n\n        .explorer-readout {\n            display: grid;\n            grid-template-columns: 1fr;\n            gap: var(--space-md);\n            border-top: 1px solid var(--color-border);\n            margin-top: var(--space-md);\n            padding-top: var(--space-md);\n        }\n\n        @media (min-width: 768px) {\n            .explorer-readout {\n                grid-template-columns: 1.3fr 1fr;\n            }\n        }\n\n        .explorer-caption {\n            margin: 0;\n            font-size: 0.95rem;\n        }\n\n        .explorer-nums {\n            display: grid;\n            grid-template-columns: 1fr 1fr;\n            gap: var(--space-sm);\n            margin: 0;\n        }\n\n        .explorer-num dt {\n            font-size: 0.72rem;\n            text-transform: uppercase;\n            letter-spacing: 0.08em;\n            color: var(--color-text-light);\n        }\n\n        .explorer-num dd {\n            font-family: var(--font-heading);\n            margin: 2px 0 0;\n            font-size: 1.5rem;\n            font-weight: 700;\n            line-height: 1;\n            color: var(--color-primary);\n        }\n\n        .explorer-num dd span {\n            font-size: 0.8rem;\n            font-weight: 600;\n            color: var(--color-text-light);\n        }\n\n        @media (max-width: 420px) {\n            .explorer-nums { grid-template-columns: 1fr; }\n            .explorer-num dd { font-size: 1.35rem; }\n        }\n\n        .explorer-note {\n            font-size: 0.85rem;\n            color: var(--color-text-light);\n            margin: var(--space-sm) 0 0;\n        }\n\n        \/* Results table *\/\n        .table-scroll {\n            overflow-x: auto;\n            -webkit-overflow-scrolling: touch;\n            max-width: 100%;\n            margin: var(--space-lg) 0 var(--space-sm);\n        }\n\n        \/* Tell people the table scrolls \u2014 but only between 641px and 700px,\n           which is the one range where it does. At 640px and below the table\n           collapses into stacked cards and there is nothing to swipe. *\/\n        .scroll-hint {\n            display: none;\n            font-size: 0.85rem;\n            color: var(--color-text-light);\n            margin: var(--space-md) 0 calc(-1 * var(--space-sm));\n        }\n\n        @media (min-width: 641px) and (max-width: 700px) {\n            .scroll-hint { display: block; }\n        }\n\n        .data-table {\n            width: 100%;\n            min-width: 620px;\n            border-collapse: collapse;\n            font-size: 0.95rem;\n        }\n\n        .data-table thead {\n            background: var(--color-primary);\n            color: white;\n        }\n\n        .data-table th {\n            padding: var(--space-sm) var(--space-md);\n            text-align: right;\n            font-size: 0.85rem;\n            font-weight: 600;\n            color: white !important;\n            vertical-align: bottom;\n        }\n\n        .data-table th:first-child {\n            text-align: left;\n        }\n\n        .data-table td {\n            padding: var(--space-sm) var(--space-md);\n            text-align: right;\n            border-bottom: 1px solid var(--color-border);\n        }\n\n        .data-table td:first-child {\n            text-align: left;\n            font-weight: 600;\n            color: var(--color-primary);\n        }\n\n        .data-table tr.subhead td {\n            background: var(--color-bg-card);\n            color: var(--color-primary);\n            font-weight: 700;\n            text-align: left;\n        }\n\n        .data-table tr.subhead td span {\n            font-weight: 400;\n            font-size: 0.8rem;\n            color: var(--color-text-light);\n            margin-left: var(--space-xs);\n        }\n\n        .data-table tr.highlight td {\n            background: var(--color-green-light);\n        }\n\n        .data-table .is-up {\n            color: var(--color-green);\n            font-weight: 600;\n        }\n\n        .data-table .is-down {\n            color: var(--color-flag);\n        }\n\n        .table-note {\n            font-size: 0.85rem;\n            color: var(--color-text-light);\n            margin: 0 0 var(--space-lg);\n        }\n\n        \/* Limitations box *\/\n        .limits-box {\n            background: var(--color-bg-alt);\n            border: 1px solid var(--color-border);\n            border-left: 4px solid var(--color-text-light);\n            border-radius: 0 0.5rem 0.5rem 0;\n            padding: var(--space-md) var(--space-lg);\n            margin: var(--space-xl) 0;\n        }\n\n        .limits-box h4 {\n            margin-top: 0;\n        }\n\n        .limits-box ul {\n            margin-bottom: 0;\n        }\n\n        \/* Paper \/ citation card *\/\n        .paper-card {\n            display: grid;\n            grid-template-columns: 1fr;\n            gap: var(--space-lg);\n            background: var(--color-bg-alt);\n            border: 1px solid var(--color-border);\n            border-radius: 1rem;\n            padding: var(--space-lg);\n            margin: var(--space-lg) 0;\n        }\n\n        @media (min-width: 640px) {\n            .paper-card {\n                grid-template-columns: 180px minmax(0, 1fr);\n            }\n        }\n\n        \/* No cover image available: collapse to a single full-width column\n           so the text does not get trapped in the 180px image track. *\/\n        .paper-card.no-cover {\n            grid-template-columns: minmax(0, 1fr);\n        }\n\n        .paper-card img {\n            border-radius: 0.5rem;\n            border: 1px solid var(--color-border);\n        }\n\n        .paper-title {\n            font-family: var(--font-heading);\n            font-size: 1.25rem;\n            line-height: 1.3;\n            color: var(--color-primary);\n            margin: 0 0 var(--space-xs);\n        }\n\n        .paper-authors {\n            font-size: 0.95rem;\n            margin: 0 0 var(--space-xs);\n        }\n\n        .paper-meta {\n            font-size: 0.85rem;\n            color: var(--color-text-light);\n            margin: 0 0 var(--space-md);\n        }\n\n        .btn-row {\n            display: flex;\n            flex-wrap: wrap;\n            gap: var(--space-xs);\n            margin-bottom: var(--space-md);\n        }\n\n        .btn {\n            display: inline-block;\n            background: var(--color-accent);\n            color: white !important;\n            text-decoration: none;\n            padding: 0.6rem 1.1rem;\n            border-radius: 0.5rem;\n            font-size: 0.9rem;\n            font-weight: 600;\n            transition: background 0.2s ease;\n        }\n\n        .btn:hover {\n            background: var(--color-primary);\n        }\n\n        .btn.secondary {\n            background: transparent;\n            color: var(--color-accent) !important;\n            border: 1px solid var(--color-border);\n     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Warum diese Studie wichtig ist<\/a><\/li>\n                    <li><a href=\"#at-a-glance\">2. Die Studie auf einen Blick<\/a><\/li>\n                    <li><a href=\"#three-ways\">3. Drei Wege zur Durchf\u00fchrung<\/a><\/li>\n                    <li><a href=\"#method-transfer\">4. Von Batch zu kontinuierlich<\/a><\/li>\n                    <li><a href=\"#the-run\">5. Was 13 Zyklen zeigten<\/a><\/li>\n                    <li><a href=\"#results\">6. Vollst\u00e4ndige Ergebnisse und Scale-up<\/a><\/li>\n                    <li><a href=\"#implications\">7. Bedeutung f\u00fcr die Herstellung<\/a><\/li>\n                    <li><a href=\"#glossary\">8. Schl\u00fcsselbegriffe<\/a><\/li>\n                    <li><a href=\"#faq\">9. FAQs<\/a><\/li>\n                <\/ul>\n            <\/nav>\n        <\/aside>\n\n        <!-- Main Content -->\n        <article class=\"article-main\">\n            <!-- Hero Section -->\n            <header class=\"article-hero\">\n                <p class=\"eyebrow\">Research Highlight<\/p>\n                <h2>Von 80 % auf 93 % Ausbeute bei der kontinuierlichen siRNA-Aufreinigung<\/h2>\n                <p class=\"lead\">Eine etablierte Einzels\u00e4ulen-Anionenaustauschmethode f\u00fcr einen zuckerkonjugierten siRNA-Sense-Strang wurde auf den kontinuierlichen Doppelspaltenbetrieb umgestellt. Die Reinheit blieb \u00fcber der Spezifikation von 95 %, die Ausbeute stieg um 13 Prozentpunkte, und ein MCSGP-System mit demselben S\u00e4ulendurchmesser w\u00fcrde einen um 87 % h\u00f6heren Durchsatz liefern. <\/p>\n            <\/header>\n\n            <!-- Article citation card \u2014 lead position, directly under the header -->\n            <div class=\"paper-card no-cover\">\n                <!-- To show a cover image: upload it, put its URL in src below, and remove \"no-cover\" from the div above. -->\n                <img decoding=\"async\" src=\"oprd-v29-i6-cover.jpg\" width=\"620\" height=\"890\" loading=\"lazy\" alt=\"Cover von Organic Process Research and Development, Band 29, Ausgabe 6\" onerror=\"this.closest('.paper-card').classList.add('no-cover'); this.remove();\"\/>\n                <div>\n                    <p class=\"paper-title\">Kontinuierliche Aufreinigung eines konjugierten therapeutischen Short Interfering RNA mittels Anionenaustausch-Doppelspalten-Chromatographie (MCSGP)<\/p>\n                    <p class=\"paper-authors\">Richard Weldon, Tobias Vandermeersch und Thomas M\u00fcller-Sp\u00e4th<\/p>\n                    <p class=\"paper-meta\">\n                        <em>Organic Process Research &#038; Development<\/em> <strong>2025<\/strong>, 29(6), 1400\u20131410 \u00b7 Ver\u00f6ffentlicht am 2. Juni 2025<br\/> DOI: 10.1021\/acs.oprd.4c00513 \u00b7 Open Access, CC BY 4.0\n                    <\/p>\n                    <div class=\"btn-row\">\n                        <a class=\"btn\" href=\"https:\/\/doi.org\/10.1021\/acs.oprd.4c00513\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\">Vollst\u00e4ndigen Artikel lesen<\/a>\n <a class=\"btn secondary\" href=\"https:\/\/pubs.acs.org\/doi\/10.1021\/acs.oprd.4c00513\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\">Erg\u00e4nzende Informationen<\/a>\n                    <\/div>\n                    <p class=\"disclosure\">Die Autoren erkl\u00e4ren, dass keine konkurrierenden finanziellen Interessen bestehen. Richard Weldon und Thomas M\u00fcller-Sp\u00e4th sind bei YMC ChromaCon t\u00e4tig; Tobias Vandermeersch ist bei Johnson &#038; Johnson besch\u00e4ftigt, das die Finanzierung und das Ausgangsmaterial f\u00fcr die Studie bereitstellte. <\/p>\n                    <details class=\"cite-block\">\n                        <summary>Zitation (BibTeX)<\/summary>\n<pre>@article{weldon2025continuous,\n  title = {Continuous Purification of a Conjugated Short Interfering RNA\n  Therapeutic Using Anion Exchange Twin-Column Chromatography (MCSGP)},\n  author = {Weldon, Richard and Vandermeersch, Tobias\n  und M\u00fcller-Sp\u00e4th, Thomas},\n  journal = {Organic Process Research & Development},\n  volume =  {29},\n  number =  {6},\n  pages =  {1400--1410},\n  year =  {2025},\n  doi = {10.1021\/acs.oprd.4c00513}\n}<\/pre>\n                    <\/details>\n                <\/div>\n            <\/div>\n\n            <!-- Mobile TOC -->\n            <nav class=\"mobile-toc\" id=\"mobileToc\">\n                <button class=\"mobile-toc-toggle\" aria-expanded=\"false\" aria-controls=\"mobileTocList\">\n Inhaltsverzeichnis\n                <\/button>\n                <div class=\"mobile-toc-list\" id=\"mobileTocList\">\n                    <ul>\n                        <li><a href=\"#why-matters\">1. Warum diese Studie wichtig ist<\/a><\/li>\n                        <li><a href=\"#at-a-glance\">2. Die Studie auf einen Blick<\/a><\/li>\n                        <li><a href=\"#three-ways\">3. Drei Wege zur Durchf\u00fchrung<\/a><\/li>\n                        <li><a href=\"#method-transfer\">4. Von Batch zu kontinuierlich<\/a><\/li>\n                        <li><a href=\"#the-run\">5. Was 13 Zyklen zeigten<\/a><\/li>\n                        <li><a href=\"#results\">6. Vollst\u00e4ndige Ergebnisse und Scale-up<\/a><\/li>\n                        <li><a href=\"#implications\">7. Bedeutung f\u00fcr die Herstellung<\/a><\/li>\n                        <li><a href=\"#glossary\">8. Schl\u00fcsselbegriffe<\/a><\/li>\n                        <li><a href=\"#faq\">9. FAQs<\/a><\/li>\n                    <\/ul>\n                <\/div>\n            <\/nav>\n\n            <p>In der Oligonukleotid-Herstellung erfolgt der teure Schritt vor der Chromatographie. Die Festphasensynthese baut die Sequenz Kopplung f\u00fcr Kopplung auf, und jede unvollst\u00e4ndige Kopplung hinterl\u00e4sst eine chemisch \u00e4hnliche Verunreinigung \u2013 Shortmer und Longmer, die bei der Aufreinigung von einem Zielmolek\u00fcl getrennt werden m\u00fcssen, dem sie stark \u00e4hneln. Produktverluste im Polishing-Schritt m\u00fcssen durch zus\u00e4tzliche Synthese ausgeglichen werden, was die Kosten verursacht.  <\/p>\n\n            <p>Das macht die Ausbeute bei der Aufreinigung hier besonders wertvoll. Ein Polishing-Schritt, der mehr vom geladenen Material zur\u00fcckgewinnt, erm\u00f6glicht eine proportionale Verkleinerung des Synthese-Batches, wodurch Reagenzien, L\u00f6sungsmittel, Abfall und S\u00e4ulenvolumen reduziert werden. <\/p>\n\n            <div class=\"callout\">\n                <p>Diese Studie stellt eine etablierte Einzels\u00e4ulen-<strong>Anionenaustausch<\/strong>-Batch-Methode f\u00fcr einen zuckerkonjugierten siRNA-Sense-Strang auf ein kontinuierliches Doppelspalten-MCSGP-Verfahren um. Die Ausbeute steigt von 80,0 % auf 93,0 % bei einer Reinheit von 95,4 Fl\u00e4chen-%, gegen\u00fcber einer Spezifikation von >95 %. <\/p>\n            <\/div>\n\n            <p>Sie beschreibt zudem, wie die Umstellung erfolgte \u2013 ein softwaregest\u00fctztes Verfahren, um ein Batch-Chromatogramm in eine laufende kontinuierliche Methode zu \u00fcberf\u00fchren \u2013 und prognostiziert, was derselbe Prozess auf Produktionsanlagen liefern w\u00fcrde.<\/p>\n\n            <!-- Section 1 -->\n            <h2 id=\"why-matters\">1. Warum diese Studie wichtig ist: Die Ausbeute ist die teure Variable<\/h2>\n\n            <p>Oligonukleotid-Medikamente haben sich vom Versprechen zum Produkt entwickelt, mit bisher 15 Zulassungen und Hunderten von Kandidaten in klinischen Studien. Die Herstellung im kommerziellen Ma\u00dfstab bleibt anspruchsvoll und teuer. Zum Zeitpunkt der Erstellung dieses Berichts ist der maximale kommerzielle GMP-Ma\u00dfstab auf einen Synthesema\u00dfstab von 2.000 mmol mittels Festphasen-Oligonukleotidsynthese begrenzt, und Verluste w\u00e4hrend der Downstream-Aufreinigung schr\u00e4nken den maximalen Aussto\u00df pro Batch weiter ein.  <\/p>\n\n            <h3>Was Batch-Polishing kostet<\/h3>\n\n            <p>Der Standard-Polishing-Schritt ist die Einzels\u00e4ulen-Ionenaustausch- oder RP-Chromatographie, wobei der reine Mittelschnitt des Chromatogramms gesammelt und der Rest beiseitegelegt wird. Da sich das Zielmolek\u00fcl nicht vollst\u00e4ndig von chemisch \u00e4hnlichen Verunreinigungen trennen l\u00e4sst, m\u00fcssen die weniger reinen Seitenschnitte entweder erneut verarbeitet oder verworfen werden. <\/p>\n\n            <ul class=\"card-list\">\n                <li>\n                    <strong>Fraktionierung und Mock-Pooling<\/strong>\n Die Ausbeuten im Batch-Modus werden maximiert, indem der Elutionspeak fraktioniert und analysiert wird, um die optimalen Grenzen f\u00fcr den Mittelschnitt zu finden, und anschlie\u00dfend mehrere Mock-Produktpools f\u00fcr analytische Tests und die Qualit\u00e4tskontrolle erstellt werden. Das Paper beschreibt diese Aufgaben als essenziell f\u00fcr die Chargenfreigabe und als erheblichen Teil des gesamten Herstellungsaufwands in einer GMP-Umgebung. \n                <\/li>\n                <li>\n                    <strong>Rechromatographie von Seitenschnitten<\/strong>\n Die g\u00e4ngige Alternative besteht darin, die au\u00dferhalb der Spezifikation liegenden Seitenfraktionen aus mehreren Chargen zu poolen und erneut laufen zu lassen. Die Seitenschnitte werden in spezielle Lagerbeutel \u00fcberf\u00fchrt, in einem begehbaren Gefrierschrank aufbewahrt, gepoolt und diafiltriert, um die Pufferzusammensetzung vor dem erneuten Laden anzupassen. Dies verbessert die Gesamtausbeute, verringert jedoch die Produktivit\u00e4t des Prozesses.  \n                <\/li>\n                <li>\n                    <strong>Die Synthese muss die Differenz ausgleichen<\/strong>\n Was im Polishing-Schritt verloren geht, muss upstream ersetzt werden. Die Oligonukleotidsynthese wird hochskaliert, um die w\u00e4hrend der Aufreinigung verlorenen Produktmengen zu kompensieren, was laut Paper sehr kostspielig ist. \n                <\/li>\n            <\/ul>\n\n            <p>MCSGP adressiert dies, indem die Seitenschnitte mit geringer Reinheit intern auf eine zweite S\u00e4ule rezirkuliert werden, wobei eine In-line-Verd\u00fcnnung die Readsorption unterst\u00fctzt, sodass eine Rechromatographie unn\u00f6tig wird. Die Technik wurde bereits f\u00fcr eine Reihe von Biomolek\u00fclen demonstriert; diese Studie erg\u00e4nzt einen Fall im Anionenaustausch-Modus an einer konjugierten siRNA, ausgehend von einem bestehenden Batch-Prozess. <\/p>\n\n            <!-- Section 2 -->\n            <h2 id=\"at-a-glance\">2. Die Studie auf einen Blick<\/h2>\n\n            <p>Das Molek\u00fcl ist der Sense-Strang einer therapeutischen siRNA, synthetisiert durch Standard-Phosphoramidit-Chemie an der Festphase, wobei die Zuckerkonjugation w\u00e4hrend der Synthese erfolgte. Das Rohmaterial ging mit einer Produktreinheit von 85 Fl\u00e4chen-% in die Aufreinigung, wobei die kritische N-1-Shortmer-Verunreinigung bei 0,93 Fl\u00e4chen-% lag, bei einer Zielreinheitsspezifikation von mehr als 95 %. <\/p>\n\n            <div class=\"stats-grid\">\n                <div class=\"stat-card\">\n                    <div class=\"stat-value is-green\">93,0 <span>%<\/span><\/div>\n                    <p class=\"stat-label\">Produktausbeute, gegen\u00fcber 80,0 % beim Batch-Prozess im Pilotma\u00dfstab<\/p>\n                <\/div>\n                <div class=\"stat-card\">\n                    <div class=\"stat-value is-green\">87 <span>%<\/span><\/div>\n                    <p class=\"stat-label\">H\u00f6herer Durchsatz als bei einem Batch-System mit demselben S\u00e4ulendurchmesser durch den Betrieb von zwei S\u00e4ulen<\/p>\n                <\/div>\n                <div class=\"stat-card\">\n                    <div class=\"stat-value\">95.4<\/div>\n                    <p class=\"stat-label\">Fl\u00e4chen-% Produktreinheit, bei einer Spezifikation von mehr als 95 %<\/p>\n                <\/div>\n                <div class=\"stat-card\">\n                    <div class=\"stat-value\">17 <span>h<\/span><\/div>\n                    <p class=\"stat-label\">Ein Lauf: 13 Zyklen und 27 Produktelutionen, einschlie\u00dflich Start und Herunterfahren<\/p>\n                <\/div>\n            <\/div>\n\n            <h3>Was gefahren wurde und worauf<\/h3>\n\n            <div class=\"two-col-grid\">\n                <div class=\"grid-card\">\n                    <h4>Der Batch-Benchmark<\/h4>\n                    <p>Eine Anionenaustausch-Polishing-Methode im Pilotma\u00dfstab auf einer <strong>20 \u00d7 5 cm i.d. S\u00e4ule<\/strong> (393 mL) mit TOSOH TSKgel SuperQ-5PW, 20 \u00b5m, betrieben auf einer \u00c4KTA pure 150 M. Diese wurde um den Faktor <strong>78,6<\/strong> auf eine 10 \u00d7 0,8 cm i.d. S\u00e4ule auf einem Contichrom CUBE 30 downgescaled, wobei Beladung, Waschvolumina, lineare Flussraten und Gradient konstant gehalten wurden.<\/p>\n                <\/div>\n                <div class=\"grid-card\">\n                    <h4>Der kontinuierliche Prozess<\/h4>\n                    <p>MCSGP auf demselben Contichrom CUBE 30 und demselben Harz, mit UV-Detektoren an jedem S\u00e4ulenauslass bei 280 nm. Die Methode wurde aus dem downgescaleten Batch-Chromatogramm mit dem <strong>MCSGP Wizard v8.1<\/strong> erstellt und anschlie\u00dfend \u00fcber 13 Zyklen bei einer Beladung von 15,80 g pro Liter Harz pro Zyklus betrieben. <\/p>\n                <\/div>\n            <\/div>\n\n            <p>Beide Eluenten waren von der gleichen Art: 20 mM Natriumphosphat mit 10 Vol.-% Acetonitril bei pH 8,0, wobei Natriumchlorid den Gradienten lieferte. Die Pilotmethode verwendete 0,9 M NaCl in der mobilen Phase B und die Downscale-L\u00e4ufe 1,1 M, was in den Downscale-L\u00e4ufen zu einem schmaleren Peak f\u00fchrte \u2013 ein Unterschied, von dem die Autoren erwarteten, dass die interne Rezirkulierung ihn kompensieren w\u00fcrde. <\/p>\n\n            <!-- Section 3 -->\n            <h2 id=\"three-ways\">3. Drei Wege, dieselbe Trennung durchzuf\u00fchren<\/h2>\n\n            <p>Die Studie berichtet \u00fcber drei Prozesse mit derselben Chemie: die Pilot-Batch-Methode, dieselbe Methode downgescaled und MCSGP, basierend auf dieser downgescaleten Methode. Der Vergleich aller drei trennt den Effekt des Betriebsmodus vom Effekt der S\u00e4ulengeometrie. <\/p>\n\n            <div class=\"explorer\">\n                <div class=\"explorer-tabs\" role=\"group\" aria-label=\"Select a process to highlight\">\n                    <button type=\"button\" class=\"explorer-tab\" data-state=\"a\" aria-pressed=\"true\">Batch, Pilotma\u00dfstab <small>20 \u00d7 5 cm S\u00e4ule<\/small><\/button>\n <button type=\"button\" class=\"explorer-tab\" data-state=\"b\" aria-pressed=\"false\">Batch, downgescaled <small>10 \u00d7 0.8 cm S\u00e4ule<\/small><\/button>\n <button type=\"button\" class=\"explorer-tab\" data-state=\"c\" aria-pressed=\"false\">MCSGP <small>Doppelspalte, 13 Zyklen<\/small><\/button>\n                <\/div>\n\n                <div class=\"plot-scroll\">\n                <svg class=\"explorer-plot\" viewbox=\"0 0 760 352\" role=\"img\" aria-label=\"Four performance metrics compared across three processes. Product purity is essentially unchanged at 95.0, 95.79 and 95.44 area percent for the pilot batch, downscaled batch and MCSGP respectively. Product yield is 80.0, 77.32 and 93.02 percent. Productivity is 5.28, 10.09 and 9.88 grams per liter of resin per hour. Buffer consumption is 1.25, 1.29 and 1.86 liters per gram of product, where lower is better.\">\n\n                    <!-- metric labels -->\n                    <g text-anchor=\"end\">\n                        <text x=\"250\" y=\"82\" fill=\"#2d3748\">Product purity<\/text>\n                        <text x=\"250\" y=\"96\" fill=\"#718096\">area%<\/text>\n                        <text x=\"250\" y=\"152\" fill=\"#2d3748\">Product yield<\/text>\n                        <text x=\"250\" y=\"166\" fill=\"#718096\">%<\/text>\n                        <text x=\"250\" y=\"222\" fill=\"#2d3748\">Productivity<\/text>\n                        <text x=\"250\" y=\"236\" fill=\"#718096\">g\/L<tspan dy=\"3\" font-size=\"8\">resin<\/tspan><tspan dy=\"-3\">\/h<\/tspan><\/text>\n                        <text x=\"250\" y=\"292\" fill=\"#2d3748\">Buffer consumption<\/text>\n                        <text x=\"250\" y=\"306\" fill=\"#718096\">L\/g \u00b7 lower is better<\/text>\n                    <\/g>\n\n                    <!-- all twelve bars, dimmed; the active state redraws its four on top -->\n                    <g fill-opacity=\"0.22\">\n                        <rect x=\"280\" y=\"58\" width=\"416\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#2D3748\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"78\" width=\"420\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#2E75B6\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"98\" width=\"418\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#C0392B\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"128\" width=\"361\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#2D3748\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"148\" width=\"349\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#2E75B6\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"168\" width=\"420\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#C0392B\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"198\" width=\"220\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#2D3748\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"218\" width=\"420\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#2E75B6\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"238\" width=\"411\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#C0392B\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"268\" width=\"282\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#2D3748\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"288\" width=\"291\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#2E75B6\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"308\" width=\"420\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#C0392B\"><\/rect>\n                    <\/g>\n\n                    <!-- STATE A: pilot-scale batch -->\n                    <g class=\"explorer-state is-on\" id=\"oligo-st-a\">\n                        <rect x=\"280\" y=\"58\" width=\"416\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#2D3748\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"128\" width=\"361\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#2D3748\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"198\" width=\"220\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#2D3748\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"268\" width=\"282\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#2D3748\"><\/rect>\n                        <g fill=\"#2D3748\">\n                            <text x=\"704\" y=\"70\">95.0<\/text>\n                            <text x=\"649\" y=\"140\">80.0<\/text>\n                            <text x=\"508\" y=\"210\">5.28<\/text>\n                            <text x=\"570\" y=\"280\">1.25<\/text>\n                        <\/g>\n                    <\/g>\n\n                    <!-- STATE B: downscaled batch -->\n                    <g class=\"explorer-state\" id=\"oligo-st-b\">\n                        <rect x=\"280\" y=\"78\" width=\"420\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#2E75B6\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"148\" width=\"349\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#2E75B6\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"218\" width=\"420\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#2E75B6\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"288\" width=\"291\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#2E75B6\"><\/rect>\n                        <g fill=\"#2E75B6\">\n                            <text x=\"708\" y=\"90\">95.79<\/text>\n                            <text x=\"637\" y=\"160\">77.32<\/text>\n                            <text x=\"708\" y=\"230\">10.09<\/text>\n                            <text x=\"579\" y=\"300\">1.29<\/text>\n                        <\/g>\n                    <\/g>\n\n                    <!-- STATE C: MCSGP -->\n                    <g class=\"explorer-state\" id=\"oligo-st-c\">\n                        <rect x=\"280\" y=\"98\" width=\"418\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#C0392B\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"168\" width=\"420\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#C0392B\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"238\" width=\"411\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#C0392B\"><\/rect>\n                        <rect x=\"280\" y=\"308\" width=\"420\" height=\"15\" rx=\"2\" fill=\"#C0392B\"><\/rect>\n                        <g fill=\"#C0392B\">\n                            <text x=\"706\" y=\"110\">95.44<\/text>\n                            <text x=\"708\" y=\"180\">93.02<\/text>\n                            <text x=\"699\" y=\"250\">9.88<\/text>\n                            <text x=\"708\" y=\"320\">1.86<\/text>\n                        <\/g>\n                    <\/g>\n                <\/svg>\n                <\/div>\n\n                <ul class=\"explorer-legend\">\n                    <li><i style=\"background:#2D3748\"><\/i>Batch, Pilotma\u00dfstab<\/li>\n                    <li><i style=\"background:#2E75B6\"><\/i>Batch, downgescaled<\/li>\n                    <li><i style=\"background:#C0392B\"><\/i>MCSGP<\/li>\n                <\/ul>\n\n                <div class=\"explorer-readout\">\n                    <p class=\"explorer-caption\" id=\"oligoCaption\">Der Benchmark. Eine 20 \u00d7 5 cm Anionenaustauschs\u00e4ule im Pilotma\u00dfstab, wobei ein Mittelschnitt gesammelt wurde, um das Reinheitsziel von >95 % zu erreichen. Dieser Schnitt gewinnt <strong>80,0 %<\/strong> des Produkts zur\u00fcck \u2013 ein Wert, den das Paper als typisch f\u00fcr die pr\u00e4parative Batch-Chromatographie beschreibt.  <\/p>\n                    <dl class=\"explorer-nums\">\n                        <div class=\"explorer-num\"><dt>Reinheit<\/dt><dd id=\"oligoPurity\">95,0 <span>Fl\u00e4chen-%<\/span><\/dd><\/div>\n                        <div class=\"explorer-num\"><dt>Ausbeute<\/dt><dd id=\"oligoYield\">80,0 <span>%<\/span><\/dd><\/div>\n                        <div class=\"explorer-num\"><dt>Produktivit\u00e4t<\/dt><dd id=\"oligoProd\">5,28<span> g\/L<sub>Harz<\/sub>\/h<\/span><\/dd><\/div>\n                        <div class=\"explorer-num\"><dt>Puffer<\/dt><dd id=\"oligoBuffer\">1,25 <span>L\/g<\/span><\/dd><\/div>\n                    <\/dl>\n                <\/div>\n\n                <p class=\"explorer-note\">Werte wie in Tabelle 4 der Studie berichtet. Jede Metrik ist auf den gr\u00f6\u00dften der drei Werte skaliert, sodass die Balkenl\u00e4ngen innerhalb einer Zeile und nicht zwischen den Zeilen verglichen werden. Die Farben folgen den Abbildungen des Papers: Schwarz und Blau f\u00fcr die Pilot- und Downscale-Batch-Spuren in Abbildung 3A, Rot f\u00fcr das MCSGP-Produktsammelfenster in Abbildung 4B. Die Reinheit f\u00fcr den downgescaleten Batch wurde nur mittels HPLC-UV bestimmt, nicht mittels HPLC-UV\/MS wie bei den anderen beiden.   <\/p>\n            <\/div>\n\n            <!-- Section 4 -->\n            <h2 id=\"method-transfer\">4. Von der Batch-Methode zum kontinuierlichen Prozess<\/h2>\n\n            <p>MCSGP ist komplexer einzurichten als die Einzels\u00e4ulen-Chromatographie, und das Paper stellt fest, dass spezialisierte Prozessentwicklungstools zur Optimierung und Implementierung erforderlich sind. Sein praktischer Beitrag ist ein Verfahren, das bei etwas ansetzt, das ein Prozesschemiker bereits hat \u2013 einem fraktionierten Batch-Chromatogramm mit Reinheitsdaten \u2013 und dieses in eine laufende Doppelspalten-Methode \u00fcberf\u00fchrt. <\/p>\n\n            <ul class=\"card-list\">\n                <li>\n                    <strong>Durchf\u00fchrung einer Batch-Design-Methode<\/strong>\n Der downgescalete Batch-Lauf wurde mit einer erh\u00f6hten Elutionsflussrate von 200 cm\/h wiederholt, um die MCSGP-Leistung zu maximieren, das Eluat fraktioniert und jede Fraktion mittels HPLC analysiert. Das Chromatogramm wurde dann mit den gemessenen Fraktionsreinheiten \u00fcberlagert. \n                <\/li>\n                <li>\n                    <strong>Festlegen der Phasengrenzen am Bildschirm<\/strong>\n Dieses Chromatogramm und seine Reinheitsdaten wurden in den MCSGP Wizard v8.1 hochgeladen. Die Grenzen zwischen den Rezirkulierungs- und Sammelphasen wurden per Drag-and-Drop gegen das Reinheitsprofil festgelegt, um die Reinheit des Produktsammelfensters zu optimieren. \n                <\/li>\n                <li>\n                    <strong>Softwaregest\u00fctzte Dimensionierung des Rests<\/strong>\n Gradientenparameter, die Beladung pro Switch und die In-line-Verd\u00fcnnungsfaktoren wurden automatisch aus dem importierten Chromatogramm und der relativen Position der Phasengrenzen berechnet. Wasch-, Reinigungs- und Regenerationsschritte wurden in eine Vorlagentabelle eingegeben. \n                <\/li>\n                <li>\n                    <strong>Ausf\u00fchren der generierten Methoden<\/strong>\n Der Wizard erstellte einen Satz von Start-, Haupt- und Shutdown-Methoden, die auf der Contichrom CUBE-Hardware ausgef\u00fchrt werden konnten.\n                <\/li>\n            <\/ul>\n\n            <h3>Was die vier Phasen bewirken<\/h3>\n\n            <p>Jeder MCSGP-Switch hat vier Phasen, und die beiden, die die Technik definieren, sind die Rezirkulierungsschritte. In Phase 1 startet ein Gradient auf der ersten S\u00e4ule, w\u00e4hrend die zweite parallel gereinigt und regeneriert wird. In Phase 2 werden die S\u00e4ulen miteinander verbunden und der fr\u00fch eluierende Seitenschnitt mit geringer Reinheit wird von der vorgeschalteten S\u00e4ule auf die nachgeschaltete \u00fcbertragen, wobei eine In-line-Verd\u00fcnnung den Modifikatorgehalt senkt, damit das Produkt readsorbiert. In Phase 3 laufen die S\u00e4ulen wieder parallel: Reines Produkt wird von der ersten gesammelt, w\u00e4hrend die zweite frisches Rohmaterial erh\u00e4lt. In Phase 4 wird der sp\u00e4t eluierende Seitenschnitt mit geringer Reinheit auf die gleiche Weise wie in Phase 2 rezirkuliert. Die S\u00e4ulen tauschen dann die Positionen und die Sequenz wiederholt sich.     <\/p>\n\n            <div class=\"analogy-box\">\n                <h4>Eine einfache Analogie<\/h4>\n                <p>Ein Tischler kauft mehr Holz, als das fertige St\u00fcck ben\u00f6tigt, da bei jedem Brett etwas durch Schnitte und M\u00e4ngel verloren geht. Reduziert man den Verschnitt, zeigt sich die Ersparnis nicht in der Werkstatt \u2013 sie zeigt sich in der Holzrechnung. <\/p>\n                <p>Die Ausbeute bei der Aufreinigung funktioniert hier genauso. Der Polishing-Schritt ist der Schnitt; die Oligonukleotidsynthese ist das Holz, und das Holz ist der teure Teil. Die R\u00fcckgewinnung von 93 % des geladenen Produkts anstelle von 80 % bedeutet, dass ein kleinerer Synthese-Batch die gleiche Menge an fertigem Material liefert, was Reagenzien, L\u00f6sungsmittel und Abfall reduziert.  <\/p>\n            <\/div>\n\n            <!-- Section 5 -->\n            <h2 id=\"the-run\">5. Was der 13-Zyklen-Lauf zeigte<\/h2>\n\n            <p>Es wurde ein MCSGP-Lauf \u00fcber 13 Zyklen durchgef\u00fchrt, der 27 Produktelutionen einschlie\u00dflich Start und Herunterfahren \u00fcber eine Gesamtlaufzeit von 17 Stunden ergab. Die Zykluszahl war nur durch die Menge an verf\u00fcgbarem Rohmaterial f\u00fcr die Studie begrenzt. <\/p>\n\n            <h3>Konvergenz<\/h3>\n\n            <p>Ein kontinuierlicher Prozess muss sich einpendeln, bevor er beurteilt werden kann, und die Studie verfolgt dieses Einpendeln auf drei Wegen. Die Fl\u00e4che unter der UV-Kurve f\u00fcr die Produktsammelphase erreichte bis Zyklus 5 einen konstanten Wert, was darauf hindeutet, dass sich die Masse des in das System eintretenden und es verlassenden Produkts im Flie\u00dfgleichgewicht befand. Die Produktreinheit folgte demselben Muster: Sie beginnt bei 95,6 Fl\u00e4chen-%, sinkt und stabilisiert sich bei etwa 95,1 Fl\u00e4chen-%. Die kritische N-1-Verunreinigung beginnt bei 0,5 Fl\u00e4chen-%, steigt und stabilisiert sich bei etwa 0,7 Fl\u00e4chen-% \u2013 innerhalb der Spezifikation von weniger als 1,0 %.   <\/p>\n\n            <p>Die Ausbeute pro Zyklus war mit etwa 94\u201395 % stabil, wobei die Produktr\u00fcckgewinnung zwischen 127 und 130 mg pro Zyklus lag. Der Shutdown-Schritt lieferte mit 62 % einen deutlich niedrigeren Wert, was ein normales Merkmal von MCSGP ist: Er wird gegen die gr\u00f6\u00dfere Beladung w\u00e4hrend des Starts berechnet, und sein Effekt auf den Gesamtwert schrumpft mit steigender Zyklenzahl. Einschlie\u00dflich Start und Herunterfahren betrug die Gesamtausbeute 93 %.  <\/p>\n\n            <h3>Verunreinigungsakkumulation, beobachtet statt angenommen<\/h3>\n\n            <p>In dem Bereich, in dem stark adsorbierende Verunreinigungen rezirkuliert wurden, war eine gewisse Akkumulation feststellbar. Das Paper behandelt dies eher als erwartet denn als alarmierend: Eine Akkumulation von Verunreinigungen in den Rezirkulierungsbereichen ist bei MCSGP typisch und wird erst dann zum Problem, wenn sie sich in den Produktpool erstreckt und dazu f\u00fchrt, dass die Spezifikation verfehlt wird. Dies war hier nicht der Fall, und die angegebene Abhilfe, falls es dazu gekommen w\u00e4re, best\u00fcnde darin, die Rezirkulierungsfenster w\u00e4hrend des Prozessdesigns zu verengen und mehr Verunreinigungen in den Abfall zu leiten.  <\/p>\n\n            <p>Die Leitf\u00e4higkeitsspuren \u00fcberlagerten sich \u00fcber den gesamten Lauf reproduzierbar, was auf eine stabile Systemleistung hindeutet. Die Autoren stellen fest, dass die \u00dcberwachung der Fl\u00e4che unter der Kurve von Zyklus zu Zyklus dem Bediener ein Live-Signal gibt: Abweichungen von vordefinierten Grenzwerten k\u00f6nnen dazu f\u00fchren, dass ein Lauf angepasst, pausiert oder abgebrochen wird, bevor Zeit und Material verschwendet werden.<\/p>\n\n            <!-- Section 6 -->\n            <h2 id=\"results\">6. Vollst\u00e4ndige Ergebnisse und Scale-up<\/h2>\n\n            <p class=\"scroll-hint\">Wischen Sie die Tabelle zur Seite, um alle drei Prozesse zu sehen.<\/p>\n\n            <div class=\"table-scroll\">\n                <table class=\"data-table\">\n                    <thead>\n                        <tr>\n                            <th scope=\"col\">Metrik<\/th>\n <th scope=\"col\">Batch, Pilot<\/th>\n <th scope=\"col\">Batch, downgescaled<\/th>\n <th scope=\"col\">MCSGP<\/th>\n                        <\/tr>\n                    <\/thead>\n                    <tbody>\n                        <tr class=\"subhead\"><td colspan=\"4\">siRNA-Sense-Strang <span>Feed 85,0 Fl\u00e4chen-% \u00b7 Spezifikation >95 %<\/span><\/td><\/tr>\n                        <tr>\n                            <td>Produktreinheit (Fl\u00e4chen-%)<\/td>\n <td data-label=\"Batch, pilot\">95,0<\/td>\n <td data-label=\"Batch, downscaled\">95,79 *<\/td>\n <td data-label=\"MCSGP\">95,44<\/td>\n                        <\/tr>\n                        <tr>\n                            <td>Verunreinigung N-1 (Fl\u00e4chen-%)<\/td>\n <td data-label=\"Batch, pilot\">1,0<\/td>\n <td data-label=\"Batch, downscaled\">0,82 *<\/td>\n <td data-label=\"MCSGP\">0,74<\/td>\n                        <\/tr>\n                        <tr class=\"highlight\">\n                            <td>Produktausbeute (%)<\/td>\n <td data-label=\"Batch, pilot\">80,0<\/td>\n <td data-label=\"Batch, downscaled\">77,32<\/td>\n <td data-label=\"MCSGP\" class=\"is-up\">93,02<\/td>\n                        <\/tr>\n                        <tr>\n                            <td>Produktivit\u00e4t (g\/L<sub>Harz<\/sub>\/h)<\/td>\n<td data-label=\"Batch, pilot\">5,28<\/td>\n<td data-label=\"Batch, downscaled\">10,09<\/td>\n<td data-label=\"MCSGP\">9,88<\/td>\n                        <\/tr>\n                        <tr>\n                            <td>Pufferverbrauch (L\/g)<\/td>\n <td data-label=\"Batch, pilot\">1,25<\/td>\n <td data-label=\"Batch, downscaled\">1,29<\/td>\n <td data-label=\"MCSGP\" class=\"is-down\">1,86<\/td>\n                        <\/tr>\n                        <tr>\n                            <td>Produktkonzentration (g\/L)<\/td>\n <td data-label=\"Batch, pilot\">2,5<\/td>\n <td data-label=\"Batch, downscaled\">2,91<\/td>\n <td data-label=\"MCSGP\">2,80<\/td>\n                        <\/tr>\n                    <\/tbody>\n                <\/table>\n            <\/div>\n            <p class=\"table-note\">Quelle: Tabelle 4, Weldon, Vandermeersch und M\u00fcller-Sp\u00e4th, <em>Org. Process Res. Dev.<\/em> 2025, 29, 1400\u20131410 (CC BY). * Der downgescalete Batch wurde nur mittels HPLC-UV bewertet, nicht mittels Massenspektrometrie, daher sind diese beiden Werte nicht strikt mit den anderen vergleichbar. <\/p>\n\n            <h3>Die Produktivit\u00e4tszahl genau lesen<\/h3>\n\n            <p>Die Produktivit\u00e4t pro Liter Harz betrug 9,88 g\/L<sub>Harz<\/sub>\/h f\u00fcr MCSGP gegen\u00fcber 10,09 f\u00fcr den downgescaleten Batch \u2013 faktisch gleich. Der Gewinn gegen\u00fcber dem Pilot-Batch-Prozess mit 5,28 resultiert aus der Betth\u00f6he: Die downgescalete S\u00e4ule ist halb so hoch, wodurch sich die Verweilzeit w\u00e4hrend der Elution halbierte und die Produktivit\u00e4t in etwa verdoppelte. In der Praxis ergibt die halbe Betth\u00f6he bei doppelter Produktivit\u00e4t einen \u00e4hnlichen Gesamtdurchsatz, da der Durchsatz das Produkt aus Produktivit\u00e4t und S\u00e4ulenvolumen ist.  <\/p>\n\n            <p>Der im Paper berichtete Durchsatzvorteil von 87 % ist ein anderer Vergleich: Ein MCSGP-System betreibt zwei S\u00e4ulen statt einer bei gleichem S\u00e4ulendurchmesser. Anders ausgedr\u00fcckt: Eine Elution im MCSGP war in 38 Minuten abgeschlossen, gegen\u00fcber 90 Minuten f\u00fcr eine Batch-Elution an derselben 10-cm-S\u00e4ule. Drei Faktoren tragen dazu bei: die h\u00f6here Ausbeute, die h\u00f6here Elutionsflussrate bei MCSGP (200 gegen\u00fcber 150 cm\/h, was weniger Risiko birgt, da die Rezirkulierung die Ausbeute sichert) und die Tatsache, dass Regeneration, Reinigung und Beladung parallel zur Elution auf der anderen S\u00e4ule laufen.  <\/p>\n\n            <h3>Scale-up-Szenarien<\/h3>\n\n            <p>Auf dem Contichrom CUBE entwickelte MCSGP-Prozesse sind direkt auf den Contichrom TWIN skalierbar, ein Produktionssystem, das unter GMP-Bedingungen betrieben werden kann. Die Studie projiziert vier Konfigurationen. <\/p>\n\n            <p class=\"scroll-hint\">Wischen Sie die Tabelle zur Seite, um alle vier Konfigurationen zu sehen.<\/p>\n\n            <div class=\"table-scroll\">\n                <table class=\"data-table\">\n                    <thead>\n                        <tr>\n                            <th scope=\"col\">Parameter<\/th>\n <th scope=\"col\">Twin 300<\/th>\n <th scope=\"col\">Twin 500<\/th>\n <th scope=\"col\">Twin 1000<\/th>\n <th scope=\"col\">Twin 2000<\/th>\n                        <\/tr>\n                    <\/thead>\n                    <tbody>\n                        <tr>\n                            <td>S\u00e4ulen-i.d. (cm)<\/td>\n <td data-label=\"Twin 300\">20<\/td><td data-label=\"Twin 500\">30<\/td>\n <td data-label=\"Twin 1000\">45<\/td><td data-label=\"Twin 2000\">60<\/td>\n                        <\/tr>\n                        <tr>\n                            <td>S\u00e4ulenvolumen (L)<\/td>\n <td data-label=\"Twin 300\">2 \u00d7 3,0<\/td><td data-label=\"Twin 500\">2 \u00d7 7,0<\/td>\n <td data-label=\"Twin 1000\">2 \u00d7 15,8<\/td><td data-label=\"Twin 2000\">2 \u00d7 27,5<\/td>\n                        <\/tr>\n                        <tr>\n                            <td>Input, 85 Fl\u00e4chen-% (kg\/Tag)<\/td>\n <td data-label=\"Twin 300\">1,80<\/td><td data-label=\"Twin 500\">4,20<\/td>\n <td data-label=\"Twin 1000\">9,50<\/td><td data-label=\"Twin 2000\">16,50<\/td>\n                        <\/tr>\n                        <tr class=\"highlight\">\n                            <td>Output, 95,4 Fl\u00e4chen-% (kg\/Tag)<\/td>\n <td data-label=\"Twin 300\">1,42<\/td><td data-label=\"Twin 500\">3,32<\/td>\n <td data-label=\"Twin 1000\">7,51<\/td><td data-label=\"Twin 2000\">13,05<\/td>\n                        <\/tr>\n                        <tr>\n                            <td>Pufferverbrauch (L\/Tag)<\/td>\n <td data-label=\"Twin 300\">2.647<\/td><td data-label=\"Twin 500\">6.177<\/td>\n <td data-label=\"Twin 1000\">13.970<\/td><td data-label=\"Twin 2000\">24.265<\/td>\n                        <\/tr>\n                    <\/tbody>\n                <\/table>\n            <\/div>\n            <p class=\"table-note\">Quelle: Tabelle 5 der Studie. Dies sind berechnete Scale-up-Szenarien und keine demonstrierten L\u00e4ufe. Das Paper stellt fest, dass die gr\u00f6\u00dfte Konfiguration bei 24 Stunden kontinuierlichem Betrieb eine Produktion im Multitonnen-Ma\u00dfstab pro Jahr erm\u00f6glicht.  <\/p>\n\n            <!-- Section 7 -->\n            <h2 id=\"implications\">7. Was dies f\u00fcr die Oligonukleotid-Herstellung bedeutet<\/h2>\n\n            <p>Die Schlagzeile ist ein Gewinn von 13 Prozentpunkten bei der Ausbeute, aber das Argument des Papers bezieht sich darauf, was dieser Gewinn upstream bewirkt. Eine h\u00f6here chromatographische Ausbeute erm\u00f6glicht es, den chemischen Synthese-Batch bei gleichem Produktaussto\u00df proportional zu verkleinern. <\/p>\n\n            <p>Das ist wichtig, da in der Synthese die Rohstoffkosten, die kundenspezifischen Intermediate und die L\u00f6sungsmittelbelastung anfallen. Die Autoren berichten, dass MCSGP bei gleichem Produktaussto\u00df 14 % niedrigere Herstellkosten verursacht, und f\u00fchren die Einsparung auf weniger Rohstoffe und Verbrauchsmaterialien, weniger kundenspezifische Oligonukleotid-Intermediate, kleinere Synthese-Batches und geringere Mengen an Chromatographieharz zur\u00fcck. Speziell beim Harz berechnen sie, dass ein Einzels\u00e4ulen-Batch-System im Produktionsma\u00dfstab 86 % mehr Harz ben\u00f6tigt als MCSGP f\u00fcr den gleichen Aussto\u00df \u2013 und stellen fest, dass diese Zahl den Unterschied m\u00f6glicherweise noch untersch\u00e4tzt, da die Batch-Chromatographie normalerweise nicht kontinuierlich betrieben wird.  <\/p>\n\n            <p>Neben den gemessenen Prozessverbesserungen f\u00fchrt das Paper eine Reihe von betrieblichen Vorteilen auf, die es durch Automatisierung erwartet: weniger In-Prozess-Kontrollproben und damit ein geringerer GMP-Analytikaufwand, der Wegfall der Rechromatographie mit ihren Lagerbeuteln, Gefrierkapazit\u00e4ten und der Diafiltration, weniger Interaktion durch das Bedienpersonal und weniger Spielraum f\u00fcr Anwenderfehler sowie kleinere S\u00e4ulen, die einfacher zu packen sind. Diese Punkte werden in dieser Studie eher argumentativ dargelegt als gemessen. <\/p>\n\n            <p>Eine methodische Anmerkung, die man im Hinterkopf behalten sollte: Die Anionenaustauschmethode erreichte hier sowohl im Batch- als auch im MCSGP-Modus eine Reinheit von \u00fcber 95 %, w\u00e4hrend NaOH-basierte AIEX-Methoden nach Erfahrung der Autoren normalerweise 88\u201392 % liefern. Sie vermuten, dass die phosphatgepufferte mobile Phase mit 10 % Acetonitril die Selektivit\u00e4t durch Reduzierung unerw\u00fcnschter hydrophober Wechselwirkungen verbessert haben k\u00f6nnte, stellen aber auch fest, dass das Rohmaterial bereits mit einer hohen Ausgangsreinheit von 85 % eintrat. <\/p>\n\n            <div class=\"limits-box\">\n                <h4>Was die Studie nicht behauptet<\/h4>\n                <ul class=\"simple-list\">\n                    <li><strong>AutoPeak wurde nicht bewertet.<\/strong>  Die hier verwendete MCSGP-Methode war vollst\u00e4ndig zeitbasiert. Eine UV-basierte dynamische Prozesssteuerung wurde weggelassen, da das Rohmaterial begrenzt war \u2013 und das Paper stellt fest, dass AutoPeak im GMP-Ma\u00dfstab essenziell ist, um Retentionszeitunterschiede auszugleichen, die durch Variabilit\u00e4t beim Packen der S\u00e4ulen, der Pufferherstellung oder der Konsistenz des Ausgangsmaterials verursacht werden. <\/li>\n                    <li><strong>Der Pufferverbrauch war h\u00f6her, nicht niedriger.<\/strong>  1,86 L\/g f\u00fcr MCSGP gegen\u00fcber 1,25 L\/g f\u00fcr den Pilot-Batch. Eine Optimierung lag mangels Rohmaterial au\u00dferhalb des Rahmens der Studie. Die Autoren identifizieren drei Wege, von denen sie eine Reduzierung erwarten: einen weniger konservativen In-line-Verd\u00fcnnungsfaktor, den Verzicht auf den optionalen Waschschritt nach der starken Rezirkulierung und eine Erh\u00f6hung der Beladung.  <\/li>\n                    <li><strong>Die Produktivit\u00e4t pro Liter Harz wurde erreicht, nicht verbessert.<\/strong> 9,88 gegen\u00fcber 10,09 g\/L<sub>Harz<\/sub>\/h f\u00fcr den downgescaleten Batch. Der Durchsatzvorteil ergibt sich aus dem Betrieb zweier S\u00e4ulen und aus der parallelen Taktung \u2013 nicht aus einer produktiveren Trennung. <\/li>\n                    <li><strong>Die Scale-up-Tabelle ist eine Projektion.<\/strong>  Die vier Twin-Konfigurationen sind berechnete Szenarien, keine demonstrierten Produktionsl\u00e4ufe.<\/li>\n                    <li><strong>Ein Molek\u00fcl, 13 Zyklen, begrenztes Ausgangsmaterial.<\/strong>  Die Zyklenzahl wurde durch die Verf\u00fcgbarkeit des Rohmaterials und nicht durch die Prozessstabilit\u00e4t bestimmt, und eine Optimierung der Beladung wurde f\u00fcr MCSGP nicht versucht.<\/li>\n                    <li><strong>Zwei Reinheitswerte sind nicht strikt vergleichbar.<\/strong>  Der downgescalete Batch wurde allein mittels HPLC-UV bewertet; die Werte f\u00fcr den Pilot-Batch und MCSGP stammen aus HPLC-UV\/MS.<\/li>\n                    <li><strong>Zugeh\u00f6rigkeiten und Finanzierung.<\/strong>  Die Autoren erkl\u00e4ren, dass keine konkurrierenden finanziellen Interessen bestehen. Zwei sind bei YMC ChromaCon angestellt, die MCSGP kommerzialisiert; der dritte ist bei Johnson &#038; Johnson t\u00e4tig, das die Studie finanzierte und das Ausgangsmaterial lieferte. <\/li>\n                <\/ul>\n            <\/div>\n\n            <!-- Section 8 -->\n            <h2 id=\"glossary\">8. Schl\u00fcsselbegriffe in dieser Studie (Glossar)<\/h2>\n\n            <table class=\"glossary-table\">\n                <thead>\n                    <tr>\n                        <th>Begriff<\/th>\n                        <th>Definition<\/th>\n                    <\/tr>\n                <\/thead>\n                <tbody>\n                    <tr>\n                        <td>AIEX<\/td>\n <td>Anionenaustausch-Chromatographie, die Molek\u00fcle nach negativer Ladung trennt. Gut geeignet f\u00fcr Oligonukleotide, deren Phosphatger\u00fcst eine zur Sequenzl\u00e4nge proportionale Ladung tr\u00e4gt.<\/td>\n                    <\/tr>\n                    <tr>\n                        <td>Fl\u00e4chen-%<\/td>\n <td>Reinheit, ausgedr\u00fcckt als Prozentsatz der gesamten Peakfl\u00e4che, die dem Produkt in einer analytischen HPLC-Spur zuzuordnen ist.<\/td>\n                    <\/tr>\n                    <tr>\n                        <td>AutoPeak<\/td>\n <td>UV-basierte dynamische Prozesssteuerung f\u00fcr MCSGP, die Verschiebungen der Peak-Retentionszeit ausgleicht, die durch Variationen bei der Eluentenherstellung, dem Packen der S\u00e4ulen oder der Qualit\u00e4t des Ausgangsmaterials verursacht werden. In dieser Studie nicht verwendet.<\/td>\n                    <\/tr>\n                    <tr>\n                        <td>Mittelschnitt<\/td>\n <td>Der reine zentrale Teil eines Batch-Elutionspeaks, der als Produkt gesammelt wird. Seine Grenzen werden durch Fraktionierung und Analyse des Peaks ermittelt.<\/td>\n                    <\/tr>\n                    <tr>\n                        <td>Zyklus und Switch<\/td>\n <td>Ein Switch ist eine Elution von einer S\u00e4ule, bestehend aus vier Phasen. Ein Zyklus besteht aus zwei Switches \u2013 einer Elution von jeder der beiden S\u00e4ulen.<\/td>\n                    <\/tr>\n                    <tr>\n                        <td>Zyklisches Flie\u00dfgleichgewicht<\/td>\n <td>Der Zustand in einem kontinuierlichen Prozess, bei dem jeder Zyklus den vorherigen reproduziert. Hier in Zyklus 5 erreicht.<\/td>\n                    <\/tr>\n                    <tr>\n                        <td>In-line-Verd\u00fcnnung<\/td>\n <td>Verd\u00fcnnung des rezirkulierten Stroms zwischen miteinander verbundenen S\u00e4ulen, wodurch der Modifikatorgehalt gesenkt wird, sodass das Produkt auf der nachgeschalteten S\u00e4ule readsorbiert, anstatt sie zu passieren.<\/td>\n                    <\/tr>\n                    <tr>\n                        <td>MCSGP<\/td>\n <td>Multicolumn Countercurrent Solvent Gradient Purification: ein kontinuierliches Doppelspalten-Chromatographieverfahren, das Seitenschnitte mit geringer Reinheit intern rezirkuliert, anstatt sie zu verwerfen.<\/td>\n                    <\/tr>\n                    <tr>\n                        <td>N-1-Verunreinigung<\/td>\n <td>Ein Shortmer, das einen Nukleotid k\u00fcrzer als das Zielmolek\u00fcl ist und durch eine unvollst\u00e4ndige Kopplung w\u00e4hrend der Synthese entsteht. Die in dieser Studie verfolgte kritische Verunreinigung mit einer Spezifikation von weniger als 1,0 Fl\u00e4chen-%.<\/td>\n                    <\/tr>\n                    <tr>\n                        <td>Oligonukleotid-Medikament (OND)<\/td>\n <td>Ein Therapeutikum, das aus einer kurzen Nukleotidsequenz besteht und in der Lage ist, die Genexpression mit hoher Spezifit\u00e4t zu modulieren.<\/td>\n                    <\/tr>\n                    <tr>\n                        <td>Produktivit\u00e4t<\/td>\n <td>Masse des Produkts pro Liter Harz pro Stunde. Sie h\u00e4ngt sowohl von der Betth\u00f6he als auch von der Trennung ab und sollte daher zwischen S\u00e4ulen mit \u00e4hnlicher Geometrie verglichen werden.<\/td>\n                    <\/tr>\n                    <tr>\n                        <td>Rechromatographie<\/td>\n <td>Zusammenf\u00fchren von Seitenfraktionen au\u00dferhalb der Spezifikation aus mehreren Chargen und erneutes Durchlaufenlassen zur R\u00fcckgewinnung von Produkt. Verbessert die Ausbeute, senkt jedoch die Gesamtproduktivit\u00e4t und wird durch MCSGP \u00fcberfl\u00fcssig.<\/td>\n                    <\/tr>\n                    <tr>\n                        <td>Sense-Strang<\/td>\n <td>Einer der beiden Str\u00e4nge einer doppelstr\u00e4ngigen siRNA. Der in dieser Studie aufgereinigte Strang trug eine w\u00e4hrend der Synthese hinzugef\u00fcgte Zuckerkonjugation.<\/td>\n                    <\/tr>\n                    <tr>\n                        <td>Seitenschnitt<\/td>\n <td>Die Fraktion mit geringerer Reinheit auf beiden Seiten des Mittelschnitts, in der das Produkt mit eng verwandten Verunreinigungen \u00fcberlappt.<\/td>\n                    <\/tr>\n                    <tr>\n                        <td>SPOS<\/td>\n <td>Solid Phase Oligonucleotide Synthesis (Festphasen-Oligonukleotidsynthese), der Standardweg f\u00fcr die Herstellung von Oligonukleotiden im Ma\u00dfstab.<\/td>\n                    <\/tr>\n                    <tr>\n                        <td>Durchsatz<\/td>\n <td>Produktivit\u00e4t multipliziert mit dem S\u00e4ulenvolumen. Dies ist die Zahl, die bestimmt, wie viel ein System pro Zeiteinheit produziert, im Gegensatz dazu, wie stark das Harz beansprucht wird.<\/td>\n                    <\/tr>\n                    <tr>\n                        <td>Schwache und starke Rezirkulierung<\/td>\n <td>R\u00fcckf\u00fchrung des fr\u00fch eluierenden Seitenschnitts (schwach, Phase 2) und des sp\u00e4t eluierenden Seitenschnitts (stark, Phase 4) auf die nachgeschaltete S\u00e4ule.<\/td>\n                    <\/tr>\n                <\/tbody>\n            <\/table>\n\n            <!-- Section 9 - FAQ -->\n            <h2 id=\"faq\">9. H\u00e4ufig gestellte Fragen<\/h2>\n\n            <div class=\"faq-section\">\n                <div class=\"faq-item\">\n                    <button class=\"faq-question\" aria-expanded=\"false\">\n  Kann kontinuierliche Chromatographie zur Aufreinigung von Oligonukleotiden verwendet werden?\n                    <\/button>\n                    <div class=\"faq-answer\">\n                        <div class=\"faq-answer-inner\">\n                            <p>Ja. Diese Studie wandelte eine etablierte Einzels\u00e4ulen-Anionenaustausch-Batch-Methode f\u00fcr einen zuckerkonjugierten siRNA-Sense-Strang in einen kontinuierlichen Doppelspalten-MCSGP-Prozess um, der \u00fcber 17 Stunden 13 Zyklen und 27 Produktelutionen durchlief. Die Ausbeute stieg von 80,0 % auf 93,02 %, w\u00e4hrend die Reinheit bei 95,44 Fl\u00e4chen-% blieb, gegen\u00fcber einer Spezifikation von mehr als 95 %.  <\/p>\n                        <\/div>\n                    <\/div>\n                <\/div>\n\n                <div class=\"faq-item\">\n                    <button class=\"faq-question\" aria-expanded=\"false\">\n  Funktioniert MCSGP mit Anionenaustausch oder nur mit Reversed Phase?\n                    <\/button>\n                    <div class=\"faq-answer\">\n                        <div class=\"faq-answer-inner\">\n                            <p>Beides. Diese Fallstudie demonstriert die Technik im Anionenaustausch-Modus. Das Paper stellt fest, dass MCSGP dieselben station\u00e4ren Phasen und Eluentenkombinationen wie das Einzels\u00e4ulen-Polishing verwendet \u2013 Ionenaustausch, Reversed Phase oder hydrophobe Interaktion \u2013 und f\u00fcr isokratische oder lineare Gradientenaufreinigungen funktioniert, vorausgesetzt, das Zielmolek\u00fcl adsorbiert vollst\u00e4ndig an der station\u00e4ren Phase und desorbiert, sobald die Modifikatorkonzentration erh\u00f6ht wird.  <\/p>\n                        <\/div>\n                    <\/div>\n                <\/div>\n\n                <div class=\"faq-item\">\n                    <button class=\"faq-question\" aria-expanded=\"false\">\n  Wie viel Ausbeute f\u00fcgt MCSGP gegen\u00fcber der Batch-Chromatographie f\u00fcr siRNA hinzu?\n                    <\/button>\n                    <div class=\"faq-answer\">\n                        <div class=\"faq-answer-inner\">\n                            <p>In diesem Fall 13 Prozentpunkte: 93,02 % f\u00fcr MCSGP gegen\u00fcber 80,0 % f\u00fcr den Batch-Prozess im Pilotma\u00dfstab bei im Wesentlichen unver\u00e4nderter Reinheit. Das Paper stellt fest, dass dies im Einklang mit fr\u00fcheren MCSGP-Studien zu Oligonukleotiden steht, bei denen Ausbeuten \u00fcber 90 % konsistent erreichbar waren. <\/p>\n                        <\/div>\n                    <\/div>\n                <\/div>\n\n                <div class=\"faq-item\">\n                    <button class=\"faq-question\" aria-expanded=\"false\">\n  Ist MCSGP produktiver als Batch-Chromatographie?\n                    <\/button>\n                    <div class=\"faq-answer\">\n                        <div class=\"faq-answer-inner\">\n                            <p>In dieser Studie nicht pro Liter Harz. Die Produktivit\u00e4t betrug 9,88 g\/L<sub>Harz<\/sub>\/h f\u00fcr MCSGP gegen\u00fcber 10,09 f\u00fcr die downgescalete Batch-Methode auf derselben S\u00e4ule \u2013 faktisch identisch. Der Vorteil liegt auf Systemebene: Ein MCSGP-System betreibt zwei S\u00e4ulen statt einer, sodass der Gesamtdurchsatz 87 % h\u00f6her w\u00e4re als bei einem Batch-System mit demselben S\u00e4ulendurchmesser. Eine MCSGP-Elution dauerte 38 Minuten gegen\u00fcber 90 Minuten f\u00fcr eine Batch-Elution an derselben S\u00e4ule, beg\u00fcnstigt durch die h\u00f6here Ausbeute, eine h\u00f6here Elutionsflussrate sowie die parallele Durchf\u00fchrung von Regeneration und Beladung zur Elution auf der anderen S\u00e4ule.   <\/p>\n                        <\/div>\n                    <\/div>\n                <\/div>\n\n                <div class=\"faq-item\">\n                    <button class=\"faq-question\" aria-expanded=\"false\">\n  Verbraucht MCSGP mehr oder weniger Puffer als die Batch-Chromatographie?\n                    <\/button>\n                    <div class=\"faq-answer\">\n                        <div class=\"faq-answer-inner\">\n                            <p>In dieser Studie mehr: 1,86 L pro Gramm Produkt gegen\u00fcber 1,25 L\/g f\u00fcr den Pilot-Batch-Prozess. Die Autoren f\u00fchren dies haupts\u00e4chlich auf die In-line-Verd\u00fcnnung zur\u00fcck, die die MCSGP-Rezirkulierung erfordert, und stellen fest, dass der Verd\u00fcnnungsfaktor konservativ hoch angesetzt wurde, um die Wiederbindung des rezirkulierten Produkts an die S\u00e4ule sicherzustellen. Sie haben den Pufferverbrauch hier nicht optimiert, da das Rohmaterial begrenzt war, und identifizieren einen niedrigeren Verd\u00fcnnungsfaktor, den Verzicht auf den optionalen Waschschritt nach der starken Rezirkulierung und eine Erh\u00f6hung der Beladung als Wege zur Reduzierung.  <\/p>\n                        <\/div>\n                    <\/div>\n                <\/div>\n\n                <div class=\"faq-item\">\n                    <button class=\"faq-question\" aria-expanded=\"false\">\n  Wie wird eine MCSGP-Methode aus einer bestehenden Batch-Methode entwickelt?\n                    <\/button>\n                    <div class=\"faq-answer\">\n                        <div class=\"faq-answer-inner\">\n                            <p>Die Batch-Elution wird fraktioniert und jede Fraktion auf Reinheit analysiert. Anschlie\u00dfend werden das Chromatogramm und seine Reinheitsdaten in die MCSGP Wizard-Software hochgeladen. Die Grenzen zwischen den Rezirkulierungs- und Sammelphasen werden per Drag-and-Drop gegen das Reinheitsprofil festgelegt, und die Software berechnet automatisch die Gradientenparameter, die Beladung pro Switch und die In-line-Verd\u00fcnnungsfaktoren und generiert fertige Start-, Haupt- und Shutdown-Methoden. <\/p>\n                        <\/div>\n                    <\/div>\n                <\/div>\n\n                <div class=\"faq-item\">\n                    <button class=\"faq-question\" aria-expanded=\"false\">\n  Welchen Ma\u00dfstab kann MCSGP f\u00fcr die Oligonukleotid-Produktion erreichen?\n                    <\/button>\n                    <div class=\"faq-answer\">\n                        <div class=\"faq-answer-inner\">\n                            <p>Die Studie projiziert vier Contichrom TWIN-Konfigurationen mit S\u00e4uleninnendurchmessern von 20 cm bis 60 cm, die zwischen etwa 1,4 und 13 kg aufgereinigten siRNA-Sense-Strang pro Tag produzieren. Dies sind berechnete Scale-up-Szenarien und keine demonstrierten L\u00e4ufe; das Paper stellt fest, dass die gr\u00f6\u00dfte Konfiguration bei 24 Stunden kontinuierlichem Betrieb eine Produktion im Multitonnen-Ma\u00dfstab pro Jahr erm\u00f6glicht. <\/p>\n                        <\/div>\n                    <\/div>\n                <\/div>\n\n                <div class=\"faq-item\">\n                    <button class=\"faq-question\" aria-expanded=\"false\">\n  Ist der vollst\u00e4ndige Artikel frei verf\u00fcgbar?\n                    <\/button>\n                    <div class=\"faq-answer\">\n                        <div class=\"faq-answer-inner\">\n                            <p>Ja. Es ist unter einer CC BY 4.0-Lizenz als Open Access in <em>Organic Process Research &#038; Development<\/em> ver\u00f6ffentlicht, sodass es unter Angabe der Quelle gelesen, heruntergeladen und weiterverwendet werden kann. Erg\u00e4nzende Informationen zum analytischen HPLC-Gradienten und den spezifischen MCSGP-Start- und Hauptmethodenparametern sind zusammen mit dem Artikel kostenlos verf\u00fcgbar.  <\/p>\n                        <\/div>\n                    <\/div>\n                <\/div>\n            <\/div>\n        <\/article>\n    <\/div>\n\n<!-- Structured data. 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A software-aided method development procedure is described for transferring a batch chromatogram to a continuous method. Across a 13-cycle run of 27 product elutions, yield rose from 80.0 to 93.02 percent at a product purity of 95.44 area percent against a specification above 95 percent, and system throughput was 87 percent higher than an equivalent batch system.\",\n      \"author\": [\n        { \"@type\": \"Person\", \"name\": \"Richard Weldon\", \"identifier\": \"https:\/\/orcid.org\/0000-0002-0957-7354\", \"affiliation\": { \"@type\": \"Organization\", \"name\": \"ChromaCon AG\" } },\n        { \"@type\": \"Person\", \"name\": \"Tobias Vandermeersch\", \"identifier\": \"https:\/\/orcid.org\/0000-0001-5143-5387\", \"affiliation\": { \"@type\": \"Organization\", \"name\": \"Johnson & Johnson\" } },\n        { \"@type\": \"Person\", \"name\": \"Thomas M\u00fcller-Sp\u00e4th\", \"affiliation\": { \"@type\": \"Organization\", \"name\": \"ChromaCon AG\" } }\n      ],\n      \"publisher\": { \"@type\": \"Organization\", \"name\": \"American Chemical Society\" },\n      \"isPartOf\": {\n        \"@type\": \"PublicationIssue\",\n        \"issueNumber\": \"6\",\n        \"datePublished\": \"2025-06\",\n        \"isPartOf\": {\n          \"@type\": \"PublicationVolume\",\n          \"volumeNumber\": \"29\",\n          \"isPartOf\": { \"@type\": \"Periodical\", \"name\": \"Organic Process Research & Development\" }\n        }\n      },\n      \"pagination\": \"1400-1410\"\n    },\n    {\n      \"@type\": \"WebPage\",\n      \"@id\": \"https:\/\/www.chromacon.com\/sirna-purification-mcsgp-anion-exchange\/\",\n      \"url\": \"https:\/\/www.chromacon.com\/sirna-purification-mcsgp-anion-exchange\/\",\n      \"name\": \"From 80% to 93% Yield in Continuous siRNA Purification\",\n      \"description\": \"How an established anion exchange batch method for a conjugated siRNA sense strand was converted to continuous twin-column MCSGP, raising yield from 80 to 93 percent at unchanged purity.\",\n      \"mainEntity\": { \"@id\": \"https:\/\/doi.org\/10.1021\/acs.oprd.4c00513\" }\n    },\n    {\n      \"@type\": \"FAQPage\",\n      \"mainEntity\": [\n        {\n          \"@type\": \"Question\",\n          \"name\": \"Can continuous chromatography be used to purify oligonucleotides?\",\n          \"acceptedAnswer\": { \"@type\": \"Answer\", \"text\": \"Yes. This study converted an established single-column anion exchange batch method for a sugar-conjugated siRNA sense strand into a continuous twin-column MCSGP process, running 13 cycles and 27 product elutions over 17 hours. Yield rose from 80.0% to 93.02% while purity held at 95.44 area%, against a specification of more than 95%.\" }\n        },\n        {\n          \"@type\": \"Question\",\n          \"name\": \"Does MCSGP work with anion exchange, or only reversed phase?\",\n          \"acceptedAnswer\": { \"@type\": \"Answer\", \"text\": \"Both. This case study demonstrates the technique in anion exchange mode. The paper notes that MCSGP uses the same stationary phases and eluent combinations as single-column polishing \u2014 ion exchange, reversed phase or hydrophobic interaction \u2014 and works for isocratic or linear gradient purifications, provided the target adsorbs fully to the stationary phase and desorbs once the modifier concentration is raised.\" }\n        },\n        {\n          \"@type\": \"Question\",\n          \"name\": \"How much yield does MCSGP add over batch chromatography for siRNA?\",\n          \"acceptedAnswer\": { \"@type\": \"Answer\", \"text\": \"In this case, 13 percentage points: 93.02% for MCSGP against 80.0% for the pilot-scale batch process, at essentially unchanged purity. The paper notes this is in line with previous MCSGP studies on oligonucleotides, where yields above 90% were consistently achievable.\" }\n        },\n        {\n          \"@type\": \"Question\",\n          \"name\": \"Is MCSGP more productive than batch chromatography?\",\n          \"acceptedAnswer\": { \"@type\": \"Answer\", \"text\": \"Not per liter of resin, in this study. Productivity was 9.88 g\/Lresin\/h for MCSGP against 10.09 for the downscaled batch method on the same column \u2014 effectively identical. The advantage is at system level: an MCSGP system runs two columns instead of one, so overall throughput would be 87% higher than a batch system of the same column diameter. One MCSGP elution took 38 minutes against 90 minutes for a batch elution from the same column, helped by the higher yield, a higher elution flow rate, and running regeneration and feeding in parallel with elution on the other column.\" }\n        },\n        {\n          \"@type\": \"Question\",\n          \"name\": \"Does MCSGP use more or less buffer than batch chromatography?\",\n          \"acceptedAnswer\": { \"@type\": \"Answer\", \"text\": \"More, in this study: 1.86 L per gram of product against 1.25 L\/g for the pilot batch process. The authors attribute this mainly to the in-line dilution that MCSGP recycling requires, and note the dilution factor was set conservatively high to ensure rebinding of the recycled product to the column. They did not optimize buffer consumption here because crude material was limited, and identify a lower dilution factor, dropping the optional wash after strong recycling, and increasing the load as routes to reduce it.\" }\n        },\n        {\n          \"@type\": \"Question\",\n          \"name\": \"How is an MCSGP method developed from an existing batch method?\",\n          \"acceptedAnswer\": { \"@type\": \"Answer\", \"text\": \"The batch elution is fractionated and each fraction analyzed for purity, then the chromatogram and its purity data are uploaded to the MCSGP Wizard software. The boundaries between the recycling and collection phases are set by drag-and-drop against the purity profile, and the software calculates the gradient parameters, the load per switch and the in-line dilution factors automatically, generating startup, main and shutdown methods ready to run.\" }\n        },\n        {\n          \"@type\": \"Question\",\n          \"name\": \"What scale can MCSGP reach for oligonucleotide production?\",\n          \"acceptedAnswer\": { \"@type\": \"Answer\", \"text\": \"The study projects four Contichrom TWIN configurations, from 20 cm to 60 cm column internal diameter, producing between roughly 1.4 and 13 kg of purified siRNA sense strand per day. These are calculated scale-up scenarios rather than demonstrated runs; the paper states that the largest configuration, at 24 hours of continuous operation, enables multiton-scale production per year.\" }\n        },\n        {\n          \"@type\": \"Question\",\n          \"name\": \"Is the full article freely available?\",\n          \"acceptedAnswer\": { \"@type\": \"Answer\", \"text\": \"Yes. It is published open access under a CC BY 4.0 license in Organic Process Research & Development, so it can be read, downloaded and reused with citation. Supporting information covering the analytical HPLC gradient and the specific MCSGP startup and main method parameters is available free of charge alongside the article.\" }\n        }\n      ]\n    },\n    {\n      \"@type\": \"BreadcrumbList\",\n      \"itemListElement\": [\n        {\"@type\":\"ListItem\",\"position\":1,\"name\":\"Research Highlights\",\"item\":\"https:\/\/www.chromacon.com\/research-highlights\/\"},\n        {\"@type\":\"ListItem\",\"position\":2,\"name\":\"From 80% to 93% Yield in Continuous siRNA Purification\",\"item\":\"https:\/\/www.chromacon.com\/sirna-purification-mcsgp-anion-exchange\/\"}\n      ]\n    }\n  ]\n}\n<\/script>\n\n<script>\/\/ FAQ Accordion functionality\n        document.querySelectorAll('.faq-question').forEach(button => {\n            button.addEventListener('click', () => {\n                const faqItem = button.parentElement;\n                const isOpen = faqItem.classList.contains('open');\n\n                \/\/ Close all other items\n                document.querySelectorAll('.faq-item').forEach(item => {\n                    item.classList.remove('open');\n                    item.querySelector('.faq-question').setAttribute('aria-expanded', 'false');\n                });\n\n                \/\/ Toggle current item\n                if (!isOpen) {\n                    faqItem.classList.add('open');\n                    button.setAttribute('aria-expanded', 'true');\n                }\n            });\n        });\n\n        \/\/ Mobile TOC toggle\n        const mobileToc = document.getElementById('mobileToc');\n        const mobileTocToggle = mobileToc.querySelector('.mobile-toc-toggle');\n\n        mobileTocToggle.addEventListener('click', () => {\n            const isOpen = mobileToc.classList.contains('open');\n            mobileToc.classList.toggle('open');\n            mobileTocToggle.setAttribute('aria-expanded', !isOpen);\n        });\n\n        \/\/ Close mobile TOC when clicking a link\n        document.querySelectorAll('.mobile-toc-list a').forEach(link => {\n            link.addEventListener('click', () => {\n                mobileToc.classList.remove('open');\n                mobileTocToggle.setAttribute('aria-expanded', 'false');\n            });\n        });\n\n        \/\/ Highlight active TOC item on scroll (desktop)\n        const observerOptions = {\n            rootMargin: '-100px 0px -70% 0px',\n            threshold: 0\n        };\n\n        const observer = new IntersectionObserver(entries => {\n            entries.forEach(entry => {\n                const id = entry.target.getAttribute('id');\n                const tocLink = document.querySelector(`.toc-list a[href=\"#${id}\"]`);\n\n                if (tocLink) {\n                    if (entry.isIntersecting) {\n                        document.querySelectorAll('.toc-list a').forEach(link => {\n                            link.classList.remove('active');\n                        });\n                        tocLink.classList.add('active');\n                    }\n                }\n            });\n        }, observerOptions);\n\n        document.querySelectorAll('h2[id]').forEach(section => {\n            observer.observe(section);\n        });\n\n        \/\/ Process comparison explorer (Section 3)\n        (function () {\n            const DATA = {\n                a: {\n                    purity: '95.0<span> area%', yield: '80.0<span>%',\n                    prod: '5.28<span> g\/L<sub>resin\/h', buffer: '1.25<span> L\/g',\n                    caption: 'The benchmark. A 20 \u00d7 5 cm anion exchange column at pilot scale, with a center ' +\n                             'cut collected to meet the >95% purity target. That cut recovers <strong>80.0% ' +\n                             'of the product \u2014 a figure the paper describes as typical for preparative batch chromatography.'\n                },\n                b: {\n                    purity: '95.79<span> area%', yield: '77.32<span>%',\n                    prod: '10.09<span> g\/L<sub>resin\/h', buffer: '1.29<span> L\/g',\n                    caption: 'The same method on a column scaled down 78.6\u00d7, used to develop the continuous process. ' +\n                             'Purity and buffer consumption hold. Productivity roughly doubles because the bed is half ' +\n                             'as tall and residence time halves \u2014 not because the separation improved. Yield is ' +\n                             '<strong>77.32%.'\n                },\n                c: {\n                    purity: '95.44<span> area%', yield: '93.02<span>%',\n                    prod: '9.88<span> g\/L<sub>resin\/h', buffer: '1.86<span> L\/g',\n                    caption: 'Same chemistry, same resin, run continuously. Yield rises to <strong>93.02% at ' +\n                             'essentially unchanged purity. Productivity per liter of resin matches the downscaled ' +\n                             'batch \u2014 the throughput gain comes from running two columns \u2014 and buffer consumption is ' +\n                             'higher at 1.86 L\/g.'\n                }\n            };\n\n            const tabs = document.querySelectorAll('.explorer-tab');\n            if (!tabs.length) return;\n\n            const caption = document.getElementById('oligoCaption');\n            const fields = {\n                purity: document.getElementById('oligoPurity'),\n                yield:  document.getElementById('oligoYield'),\n                prod:   document.getElementById('oligoProd'),\n                buffer: document.getElementById('oligoBuffer')\n            };\n\n            function show(key) {\n                const d = DATA[key];\n                if (!d) return;\n\n                ['a', 'b', 'c'].forEach(k => {\n                    const g = document.getElementById('oligo-st-' + k);\n                    if (g) g.classList.toggle('is-on', k === key);\n                });\n\n                Object.keys(fields).forEach(f => {\n                    if (fields[f]) fields[f].innerHTML = d[f];\n                });\n\n                if (caption) caption.innerHTML = d.caption;\n\n                tabs.forEach(t => t.setAttribute('aria-pressed', String(t.dataset.state === key)));\n            }\n\n            tabs.forEach(t => t.addEventListener('click', () => show(t.dataset.state)));\n        })();\n    <\/script>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Eine etablierte Anionenaustausch-Batch-Methode f\u00fcr einen konjugierten siRNA-Sense-Strang, umgestellt auf kontinuierliches Doppelspalten-MCSGP: 13 Zyklen, 27 Produktelutionen und eine Steigerung der Ausbeute von 80 % auf 93 % bei unver\u00e4nderter Reinheit \u2013 plus ein softwaregest\u00fctzter Weg vom Batch-Chromatogramm zur laufenden Methode.<\/p>\n","protected":false},"featured_media":7635,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"","article_category":[301],"class_list":["post-16635","articles","type-articles","status-publish","has-post-thumbnail","","article_category-oligo-aufreinigung"],"acf":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.chromacon.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/articles\/16635","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.chromacon.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/articles"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.chromacon.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/types\/articles"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.chromacon.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=16635"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.chromacon.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/media\/7635"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.chromacon.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=16635"}],"wp:term":[{"taxonomy":"article_category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.chromacon.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/article_category?post=16635"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}